Pierce™ Ubiquitin Enrichment Kit

Le kit d’enrichissement à l’ubiquitine Thermo Scientific Pierce facilite l’isolement des conjugués protéiques de polyubiquitine à partir de cellules et d’échantillons de tissus cultivés.

Caractéristiques du kit d’enrichissement à l’ubiquitine :

• Rapide : temps opérateur inférieur à 45 minutes pour la liaison et la récupération des protéines ubiquitinées
• Complet : comprend tous les réactifs nécessaires à l’enrichissement protéique modifié par l’ubiquitine à partir de cellules et d’échantillons de tissus cultivés
• Flexible : l’incubation des échantillons pouvant aller de 2 heures à une nuit entière permet de terminer le dosage en plusieurs heures ou en moins de 30 minutes après une incubation de nuit
• Robuste : compatible avec tous les produits de lyse cellulaire Thermo Scientific Pierce et les formulations RIPA standard
• Format à échantillons multiples : traite facilement 1 à 15 échantillons simultanément

Les fractions récupérées à partir du kit d’enrichissement à l’ubiquitine Pierce peuvent ensuite être analysées afin de déterminer la quantité de conjugués généraux d’ubiquitine présents ou d’identifier une protéine d’intérêt spécifique par transfert Western. Le protocole de dosage est rapide et direct, permettant l’isolement des protéines polyubiquitinées et le fractionnement des espèces monubiquitinées dans le flux de résine. Le kit offre des performances exceptionnelles telles que démontrées par l’enrichissement d’un lysat HeLa traité à l’époxomicine pour les protéines polyubiquitinées. Le kit d’enrichissement à l’ubiquitine surpasse les résines similaires d’autres fournisseurs et fournit une préparation protéique propre et spécifique par rapport à une résine de contrôle.

La voie du protéasome de l’ubiquitine est la principale voie non lysosomale qui contrôle la protéolyse des protéines. Cette voie est impliquée de manière significative dans divers processus cellulaires, notamment la réparation d’ADN, la régulation transcriptionnelle, la transduction de signal, le métabolisme cellulaire et la morphogenèse. Le processus d’ubiquitination est déclenché lorsque l’ubiquitine, un polypeptide de 8 kDa composé de 76 acides aminés, est ajoutée aux protéines cellulaires via la glycine de l’extrémité C-terminale de la molécule d’ubiquitine. Suite à un événement initial de monoubiquitination, la formation d’un polymère d’ubiquitine peut se produire. Les protéines polyubiquitinées sont ensuite reconnues par le protéasome 26S qui catalyse la dégradation de la protéine ubiquitinée et le recyclage de l’ubiquitine. Les différences d’ubiquitination totale ou d’ubiquitination de protéines spécifiques affectent de nombreuses conditions pathologiques, notamment les malignités, certaines maladies génétiques et les maladies neurodégénératives.¹