Pierce™ Protein G Chromatography Cartridges, 1 mL

Les cartouches de chromatographie Thermo Scientific™ Pierce™ de protéine G sont des dispositifs préemballés pratiques et prêts à l’emploi pour l’isolement et la purification des anticorps polyclonaux et monoclonaux de mammifères à partir de sérum, d’ascite et de surnageant de culture cellulaire.

L’agarose avec protéine G Pierce est composée de protéines G recombinantes ayant été immobilisées par liaison covalente sur des microbilles d’agarose réticulée à 6 % de haute qualité (CL-6B). Cette variété particulière de l’affinité de la résine fournit la combinaison la plus polyvalente de caractéristiques chromatographiques et permet une purification à haut rendement et de haute pureté pour les IgG entières provenant d’échantillons de sérum de mammifères. Les propriétés physiques et chimiques des billes d’agarose conviennent à de nombreux systèmes de purification par affinité.

Caractéristiques de l’agarose Pierce protéine G :

• Protéine G : la protéine G immobilisée est idéale pour la purification d’IgG polyclonale issue de sérum de souris, d’humain, de vache, de chèvre et de mouton, y compris les isotypes d’IgG3 humaine et d’IgG1 de souris
• Résine d’agarose : le support est constitué d’agarose en microbilles réticulées à 6 % (CL-6B), la plus demandée des résines pour les méthodes de purification par affinité des protéines
• Inerte et stable : la méthode de fabrication supérieure immobilise la protéine G par des liaisons covalentes résistantes à la lixiviation et exemptes de charges, générant des liaisons non spécifiques faibles et permettant plusieurs utilisations sans baisse de rendement
• Capacité standard : l’agarose Pierce protéine G possède une charge normale de protéine G immobilisée, offrant une capacité de liaison de la résine de 11 à 15 mg d’IgG humaine par ml

Les cartouches de chromatographie Pierce sont compatibles avec les principaux systèmes de chromatographie liquide automatisés ou avec le traitement manuel à la seringue, et se fixent directement aux systèmes ÄKTA™ ou FPLC sans connecteurs supplémentaires. Un pack d’accessoires, compris avec chaque produit, permet d’adapter facilement les colonnes pour une utilisation avec les raccords de seringue Luer-Lok ou les tubes 1/16”. Les cartouches de protéine G fournissent des séparations chromatographiques rapides, faciles et reproductibles et peuvent être régénérées pour plusieurs utilisations.

La protéine G est une protéine bactérienne de la paroi cellulaire provenant du groupe G Streptococcus et maintenant produite en tant que protéine recombinante dans E. coli. Comme la protéine A, la protéine G se lie à la plupart des immunoglobulines de mammifères, principalement par leurs régions Fc. La protéine G native contient deux sites de liaison des immunoglobulines, ainsi que des sites de liaison de l’albumine et de surface cellulaire. Dans la forme recombinante de la protéine G, ces sites de liaison de l’albumine et de surface cellulaire ont été éliminés afin de réduire les liaisons non spécifiques lors de la purification des immunoglobulines. La protéine G recombinante a une masse d’environ 21,6 kDa, mais sa taille apparente par SDS-PAGE est comprise entre 31 et 34 kDa. La fonction de liaison des IgG est optimale à pH 5 mais se produit également de façon efficace dans des conditions proches de la neutralité (pH 7,0 à 7,2).

Comparée à la protéine A, la protéine G se lie à un spectre plus étendu de sous-classes d’IgG de sérum humain, de souris et de rat. En particulier, outre sa capacité de liaison à d’autres isotypes, tout comme la protéine A, la protéine G présente une capacité de liaison plus importante aux IgG3 humaines, aux IgG1 de souris et aux trois isotypes d’IgG de rat. La protéine G est donc généralement recommandée pour des applications impliquant ces espèces et ces isotypes d’anticorps. Concernant les autres espèces, la protéine G présente une capacité de liaison plus importante pour les IgG de vache, de chèvre et de mouton, mais elle se lie plus faiblement que la protéine A aux IgG de porc, de cobaye, de chien et de chat.

L’agarose Pierce Protéine G est préparée à l’aide de l’appareil de chimie de couplage Thermo Scientific AminoLink, qui offre plusieurs avantages sur les méthodes d’immobilisation de ligand. L’immobilisation par AminoLink génère une combinaison entre les monomères de sucre des microbilles d’agarose et les résidus de lysine native sur la protéine A par de simples liaisons d’amides. Contrairement à l’immobilisation typique par bromure de cyanogène (CNBr), la méthode AminoLink n’introduit aucun nouveau groupe chimique qui pourrait causer une liaison non spécifique non désirée et produit une liaison stable, essentiellement irréversible. Cela donne une résine à forte capacité de liaison pouvant retenir la protéine immobilisée fonctionnelle