Les colonnes de centrifugation d’échange de cations forts et d’échange d’anions forts Pierce utilisent l’adsorption membranaire comme méthode chromatographique de choix pour fractionner les protéines en fonction de leurs différences de charge. La matrice de colonne a une structure très poreuse, avec des pores de plus de 3 000 nm, ce qui donne aux protéines une accessibilité disponible aux ligands chargés de la membrane. Ces membranes adsorptives maintiennent une grande efficacité à des débits élevés et lors du fractionnement de grandes biomolécules avec de petites diffusivités.

La chromatographie d’échange d’ions est largement préférée dans le préfractionnement ou la purification d’une protéine cible à partir d’échantillons biologiques bruts. Les interactions entre les molécules et les sites actifs sur la membrane échangeuse d’ions se produisent de manière convective par l’intermédiaire de pores, ce qui raccourcit le temps de diffusion comparé à celui d’un liquide à l’intérieur des pores d’une particule de résine. De plus, les conditions relativement douces de liaison et d’élution de cette méthode de séparation permettent une récupération protéique élevée avec une activité biologique intacte. Les colonnes de centrifugation échangeuses d’ions forts Pierce permettent un fractionnement rapide des protéines et une préparation d’échantillon sur la base des différences de charge. Il existe deux formats disponibles :
• Mini-format : pour la liaison de jusqu’à 4 mg (capacité de 500 µl)
• Format maxi : pour la liaison de jusqu’à 80 mg (capacité de 20 ml)

Caractéristiques des colonnes de centrifugation échangeuses d’ions forts Pierce :
• Rapide et simple : le format de centrifugation basé sur une membrane élimine le remplissage de colonne
• Pratique et expansif : le format de centrifugation permet le traitement pratique de plusieurs échantillons en parallèle
• Robuste : les membranes d’adsorption des colonnes de centrifugation ne se fissurent pas et ne s’assèchent pas
• Faible volume de lit : les faibles volumes de lit des membranes d’adsorption rendent possible de travailler avec de faibles volumes de tampon, ce qui permet d’obtenir des fractions d’élution concentrées

Applications impliquant des colonnes de centrifugation échangeuses d’ions forts
• Pré-fractionnement de protéines dans un lysat
• Recherche de conditions de purification pour les nouveaux protocoles de préparation de protéines
• Retrait des endotoxines des anticorps monoclonaux
• Polissage des protéines marquées à l’histidine après la chromatographie de chélates métalliques
• Purification et concentration de protéines
• Purification d’anticorps à partir de sérum, d’ascites ou ou de surnageant de culture de tissu
• Élimination du détergent des solutions de protéines
• Préparation des échantillons avant PAGE 1D ou 2D
• Purification de phosphopeptides avant l’analyse MS