Solution de lysozyme (50 mg/ml)
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Thermo Scientific™

Solution de lysozyme (50 mg/ml)

Le lysozyme Thermo Scientific est une enzyme capable de dégrader la paroi cellulaire bactérienne afin d’améliorer l’efficacité de l’extraction desAfficher plus
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Le lysozyme Thermo Scientific est une enzyme capable de dégrader la paroi cellulaire bactérienne afin d’améliorer l’efficacité de l’extraction des protéines ou des acides nucléiques.

Caractéristiques du lysozyme, stock de glycérol pour congélation :

• Enzyme lytique de la paroi cellulaire bactérienne qui améliore la purification des protéines des corps d’inclusion
• Compatible avec les réactifs de lyse cellulaire Thermo Scientific Pierce
• Transparent et incolore, exempt de matières insolubles
• pH : 4,7 ± 0,2
• ≥50 unités / ml à 5 µg / ml

Le lysozyme est une enzyme capable de dégrader les parois cellulaires bactériennes afin d’améliorer l’efficacité de l’extraction des protéines ou des acides nucléiques. Les lysozymes (muramidases) sont une famille d’enzymes dotées d’une activité anti-microbienne, capables de dégrader la paroi cellulaire des bactéries. L’enzyme agit en catalysant l’hydrolyse des liaisons 1,4-bêta entre l’acide N-acétylmuramique et les résidus N-acétyl-D-glucosamine dans les peptidoglycanes et entre les résidus N-acétyl-D-glucosamine dans les chitodextrines. Bien que le lysozyme présent dans le blanc d’œuf soit ultra efficace pour la lyse des bactéries à Gram positif, il facilite également la lyse des bactéries à Gram négatif, comme la Salmonella et la Shigella. La lyse d’E. coli est nettement améliorée par l’ajout du lysozyme et de nucléases telles que la DNase I.

Description et propriétés du lysozyme :
le lysozyme est naturellement présent dans les tissus végétaux et animaux ainsi que dans les sécrétions telles que les larmes, la salive et le mucus ; il est particulièrement abondant dans le blanc d’œuf, qui constitue la principale source d’approvisionnement dans le commerce. Le lysozyme présent dans le blanc d’œuf de poule (de type poussin ou c) était la première enzyme à voir sa structure cristalline de 2 angströms résolue et à faire l’objet d’études approfondies. Le lysozyme est largement utilisé pour l’extraction bactérienne des protéines. Pour la purification des corps d’inclusion, l’ajout de lysozyme permet la digestion des débris cellulaires et libère les corps d’inclusion. L’enzyme est facilement éliminée avec d’autres protéines pendant la purification par affinité propre au marqueur de fusion de la protéine recombinante cible en formant le corps d’inclusion.

• Fonction enzymatique : Catalyse l’hydrolyse des liaisons 1,4-β entre l’acide N-acétylmuramique et les résidus de la N-acétyl-D-glucosamine dans les peptidoglycanes et entre les résidus de la N-acétyl-D-glucosamine dans les chitodextrines
• Poids moléculaire : 14,388 kDa
• Coefficient d’extinction : ∼ 26,4 à 280 nm
• Point isoélectrique : pH 11,0
• Définition de l’unité : 1 unité représente la quantité d’enzyme nécessaire pour catalyser une baisse de l’absorbance à 450 nm de 0,001/min à 25 degrés au pH 6,24 dans une cuve de 1 cm, avec une lyse utilisant une suspension de ∼ 0,25 mg / ml de Micrococcus luteus.

Produits associés
Lysozyme
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
EnzymesLysozyme (Muramidase)
Quantité0,5 mL
Type de réactifEnzyme pour lyse cellulaire
FormeLiquide
Type de produitSolution de lyse
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver en dessous de -20°C

Foire aux questions (FAQ)

How can I measure the amount of protein I have extracted with B-PER reagent?

The Thermo Scientific BCA Protein Assay Kit (Cat. No. 23225, 23227) works very well to detect proteins extracted with B-PER Reagent. The Coomassie Plus Protein Assay (Cat. No. 23236) can be used with B-PER Reagent Protein extractions, however when using B-PER with PBS or B-PER II reagents, dilute the protein preparation two-to-four fold before assaying with Coomassie Plus or Prepare sample with Compat-Able Protein Assay Preparation Reagent Set (Cat. No. 23215). Finally, Thermo Scientific 660 nm Assay Kit (Cat. No. 22662) can also be used if protein extract is diluted two fold.

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How do I process bacterial samples with EasyPep MS Sample Prep kits?

Add 1-2 µL of 50 mg/mL Lysozyme Solution (Cat. No. 90082) to 200 µL of the EasyPep lysis buffer provided in the kit and proceed with the sample prep. Add 200 µL of the prepared lysis solution to 5 X 10E8 bacterial cells (E. coli cells) (OD600 equal to 1, corresponding to 1 X 10E8 CFUs). Lyse by pipetting the sample repeatedly and centrifuge at 16,000 x g for 5 mins. Alternatively, E. coli cells can be lysed in lysis buffer using bead beating or sonication instead of lysozyme. After lysis, dilute samples to 1 mg/mL using lysis buffer, proceed with the EasyPep protocol for reduction, alkylation, digestion, and clean up as described in the product manual.

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Can you explain how the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent lyses cells?

The B-PER Reagent solution contains a proprietary, mild, non-ionic detergent in 20 mM Tris-HCl, pH 7.5. It effectively disrupts cells and solubilizes native or recombinant proteins without denaturation. The reagent creates holes in the cell membrane that will leak out cytosolic proteins. The sample may become very viscous when the bacterial chromosome is released. We recommend adding DNAse I (Cat. No. 90083) to the reagent to reduce viscosity. For better lysis efficiency and if there are inclusion bodies, we recommend adding Lysozyme (Cat. No. 90082) to the reagent. Alternatively, you may purchase the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent with Enzymes Kit (Cat. No. 90078 or 90079) that includes the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent, DNase I, and Lysozyme.

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Citations et références (2)

Citations et références
Abstract
Next-generation sequencing of whole saliva from patients with primary Sjögren's syndrome and non-Sjögren's sicca reveals comparable salivary microbiota.
Authors:Sembler-Møller ML,Belstrøm D,Locht H,Enevold C,Pedersen AML
Journal:Journal of oral microbiology
PubMed ID:31497258
Objective: To characterize and compare the salivary microbiota in patients with pSS and patients with non-Sjögren's-related sicca, and to relate the findings to their oral health status and saliva flow rates. Methods: Twenty-four patients fulfilled the 2016 classification criteria for pSS and 34 did not (non-pSS). A clinical examination included ... More
Porphyromonas gingivalis in saliva associates with chronic and aggressive periodontitis.
Authors:Damgaard C,Danielsen AK,Enevold C,Massarenti L,Nielsen CH,Holmstrup P,Belstrøm D
Journal:Journal of oral microbiology
PubMed ID:31489129
Objective: To characterize the salivary microbiota of patients with aggressive periodontitis, patients with chronica periodontitis and orally healthy individuals. Methods: A total of 81 unstimulated saliva samples from aggressive periodontitis patients (n = 31), chronic periodontitis patients (n = 25), and orally healthy controls (n = 25) were examined. The ... More