Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit
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Amplex™ Acetylcholine/Acetlycholinesterase Assay Kit

Le kit de dosage d’acétylcholine / acétylcholinestérase Amplex™ Red offre une méthode ultrasensible pour détecter l’activité de l’acétylcholinestérase (AChE) dansAfficher plus
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RéférenceQuantité
A12217500 dosages
Référence A12217
Prix (EUR)
724,00
Each
Quantité:
500 dosages
Prix (EUR)
724,00
Each
Le kit de dosage d’acétylcholine / acétylcholinestérase Amplex™ Red offre une méthode ultrasensible pour détecter l’activité de l’acétylcholinestérase (AChE) dans un lecteur de microplaques à fluorescence ou un fluoromètre.

onsultez notre gamme complète de dosages de microplaques à fluorescence.

• Détectez les niveaux d’activité de l’AChE à partir de 0,002 U/ml en une heure
• Détectez les niveaux d’acétylcholine aussi bas que 0,3 µM à l’aide d’un excès d’AChE
• Atteindre des plages de détection de 0,3 µM à 100 µM
• Format d’acétylcholine permettant des mesures de points de temps multiples
• Conçu pour une interférence d’autofluorescence minimale

L’activité de l’AChE est surveillée en utilisant le 10-acétyl-3,7-dihydroxyphénoxazine (réactif Amplex™ Red), une sonde fluorogénique sensible pour le peroxyde d’hydrogène. L’AChE convertit le substrat d’acétylcholine en choline, qui est ensuite oxydée par la choline oxydase en bétaïne et en peroxyde d’hydrogène. En présence de peroxydase de raifort, le peroxyde d’hydrogène réagit avec le réactif Amplex™ Red dans un rapport stœchiométrique de 1:1 pour générer la résorufine du produit hautement fluorescent.

Étant donné que la résorufine possède des maxima d’absorption et d’émission de fluorescence d’environ 571 nm et 585 nm, respectivement, il y a peu d’interférences dues à l’autofluorescence dans la plupart des échantillons biologiques. Des expériences avec l’AChE purifié à partir d’anguille électrique indiquent que le kit d’essai Amplex™ Red Acetylcholine/Acetylcholinestérase peut détecter des niveaux d’AChE aussi faibles que 0,002 U/ml en utilisant un temps de réaction d’une heure. En fournissant un excès d’AChE dans le dosage, le kit peut également être utilisé pour détecter des niveaux d’acétylcholine aussi bas que 0,3 µM, avec une gamme de détection allant de 0,3 µM à 100 µM d’acétylcholine.

Utilisation des dosages Amplex™ Red pour une gamme étendue d’enquêtes
Une grande variété de dosages Amplex™ Red validés sont disponibles pour l’étude de la signalisation cellulaire et des lipides, de la neurobiologie, de l’inflammation et de la fonction immunitaire, et du métabolisme. Nous proposons également un réactif Amplex™ UltraRed (No de catalogue A36006), un réactif de deuxième génération caractérisé par une plus grande sensibilité et une fluorescence plus brillante, ainsi que le réactif d’arrêt Amplex™ Red/UltraRed Stop ( No de catalogue A33855). Parce qu’il permet de terminer la réaction générant le signal de fluorescence à un moment défini par l’utilisateur, le réactif Amplex™ Red/UltraRed Stop est synonyme de practicité et de contrôle. Une fois le réactif d’arrêt ajouté, le signal de fluorescence reste stable pendant au moins trois heures. Une conception et un emballage de matrice de dosage personnalisés sont également disponibles.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Méthode de détectionIntensité de fluorescence
Quantité500 dosages
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Propriétés du substratSubstrat moléculaire
Type de substratSubstrat de HRP (peroxydase de raifort), substrat d’acétylcholinestérase
Enzyme cibleAcétylcholinestérase
À utiliser avec (application)Dosage de l’acétylcholine/acétylcholinestérase
À utiliser avec (équipement)Lecteur de microplaques à fluorescence
Gamme de produitsAmplex
Type de produitTest de l’acétylcholine⁄acétylcholinestérase
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Stocker au congélateur (entre -5°C et -30°C) à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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Citations et références (8)

Citations et références
Abstract
G-CSF rescues the memory impairment of animal models of Alzheimer's disease.
Authors:Tsai KJ, Tsai YC, Shen CK,
Journal:J Exp Med
PubMed ID:17517969
'Most of the current clinical treatments for Alzheimer''s disease (AD) are largely symptomatic and can have serious side effects. We have tested the feasibility of using the granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), which is known to mobilize hematopoietic stem cells (HSCs) from the bone marrow into the peripheral blood, as a ... More
The effects of anticholinergic insecticides on human mesenchymal stem cells.
Authors:Hoogduijn MJ, Rakonczay Z, Genever PG
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16960032
'Mesenchymal stem cells (MSCs) are located primarily in the bone marrow and are characterized by their capacity to differentiate into mesenchymal lineages such as bone, fat, and cartilage in response to appropriate signals. Several signaling mechanisms act to control MSC survival, proliferation, and differentiation, and failure or disruption of these ... More
Enhanced purinergic contractile responses and P2X1 receptor expression in detrusor muscle during cycles of hypoxia-glucopenia and reoxygenation.
Authors:Elliott RA, Tonnu A, Ghaffar N, Taylor AH, Tincello DG, Norman RI,
Journal:
PubMed ID:23975903
'Bladders from patients with detrusor overactivity have an increased atropine-resistant contractile response to nerve stimulation. The bladder has also been shown to be very susceptible to hypoxia-glucopenia and reperfusion injury, leading to the hypothesis that episodes of hypoxia-glucopenia and reoxygenation result in increased atropine-resistant responses to nerve stimulation in the ... More
Role of pancreatic cancer-derived exosomes in salivary biomarker development.
Authors:Lau C, Kim Y, Chia D, Spielmann N, Eibl G, Elashoff D, Wei F, Lin YL, Moro A, Grogan T, Chiang S, Feinstein E, Schafer C, Farrell J, Wong DT,
Journal:
PubMed ID:23880764
'Recent studies have demonstrated that discriminatory salivary biomarkers can be readily detected upon the development of systemic diseases such as pancreatic cancer, breast cancer, lung cancer, and ovarian cancer. However, the utility of salivary biomarkers for the detection of systemic diseases has been undermined due to the absence of the ... More
Butyrate enemas enhance both cholinergic and nitrergic phenotype of myenteric neurons and neuromuscular transmission in newborn rat colon.
Authors:Suply E, de Vries P, Soret R, Cossais F, Neunlist M,
Journal:Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol
PubMed ID:22492692
'Postnatal changes in the enteric nervous system (ENS) are involved in the establishment of colonic motility. In adult rats, butyrate induced neuroplastic changes in the ENS, leading to enhanced colonic motility. Whether butyrate can induce similar changes during the postnatal period remains unknown. Enemas (Na-butyrate) were performed daily in rat ... More