Le kit de dosage compétitif alpha PolarScreen™ ER (Estrogen Receptor) vert offre un procédé sensible et efficace de criblage àAfficher plus
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A15883
800 dosages
A15882
2500 dosages
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Référence A15883
Prix (EUR)
1 894,00
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Le kit de dosage compétitif alpha PolarScreen™ ER (Estrogen Receptor) vert offre un procédé sensible et efficace de criblage à haut débit fondé sur la polarisation de la fluorescence des ligands ER alpha potentiels. Le kit utilise le récepteur alpha d’œstrogènes humain natif (non marqué), exprimé par des cellules d’insectes, de pleine longueur (disponible séparément, réf. A15674) et un nouveau ligand d’œstrogènes fluorescent à forte affinité (Fluormone ES2 vert) dans un format de dosage homogène, type mélange et lecture.
Ce kit produit une lecture de couleur verte ; un kit rouge est également disponible. Les deux kits déterminent convenablement les IC50 des composés compétitifs. Le choix des couleurs dépend des propriétés spectrales des composés à analyser et des instruments disponibles. Pour plus d’informations ou de l’aide, contactez drugdiscoverytech@lifetech.com.
Le kit de dosage des concurrents PolarScreen™ ER Alpha vert est :
• Complet et prêt à l’emploi : tous les réactifs sont inclus. Il vous suffit d’ajouter les composés de test • Compatible avec un débit élevé : 800 dosages de polarisation de fluorescence de 20 µl dans une plaque de 384 puits • Pratique : disponible en vrac pour répondre à des besoins de sélection plus importants
Déroulement du dosage Le récepteur ER Alpha de pleine longueur est ajouté à un ligand d’œstrogènes fluorescent pour former un complexe ER-Fluormone ES2. Ce complexe est ajouté aux différents composés d’essai dans des plaques multipuits. Pour déterminer l’affinité relative, le dosage mesure la polarisation de fluorescence. Les composés de test concurrents déplaceront le ligand Fluormone ES2 de l’ER alpha, ce qui lui permet de chuter rapidement et d’obtenir de faibles valeurs de polarisation. Un changement de la valeur de polarisation de fluorescence en présence d’un composé de test permet de déterminer l’affinité relative des composés de test pour l’ER alpha.
Tous les composants sont fabriqués selon les paramètres de qualité les plus stricts. Les performances de ce produit, conformément au certificat d’analyse, sont garanties pendant 6 mois après l’achat. Contactez-nous pour obtenir des quantités en vrac ou de l’aide sur d’autres besoins de dosage des récepteurs nucléaires, à commencer par le développement de dosages, en passant par la sélection des bibliothèques et au-delà.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (équipement)Imageur fluorescent
FormatPlaque à 384 puits
Quantité800 dosages
Méthode de détectionFluorescent
TypeDosage des concurrents ER Alpha
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contenu :
• 2 tubes de protéine recombinante ER Alpha de pleine longueur (stockage entre -68 et -85°C) • 1 tube de Fluormone ES2 Green Tracer (stockage entre -5 et -30°C) • 1 flacons de tampon de sélection ES2 (stockage entre -5 et -30°C)
Foire aux questions (FAQ)
I'm using the TaqMan hPSC Scorecard Panel. Do I need to use the template files?
We highly recommend that you use the template file because it contains all of the necessary experimental details for your qPCR run. If the template file is not working for you, please send an email to our stem cell technical support specialists at: stemcell-help@thermofisher.com.
What are the common issues encountered with FP assays?
-No assay window: Check that your instrument is designed to do FP experiments.
-Poor discrimination between the minimum and maximum mP Control (both include the receptor): This may be an indication of the quality of the receptor. Do not make single use aliquots of the receptor or store diluted.
-The type of microplate is critical: Please see if the protocol specifies untreated polystyrene or NBS-coated plates. If the plate binds the fluorescent substrate, it cannot freely rotate and the mP reading will always be high. White plates cannot be used for FP assays. Avoid the use of silanized pipette tips and vials.
-The No Receptor Control' (free Fluormone/Tracer) should have much higher RFU values compared to buffer alone. If not, there is a problem with the instrument setup or less commonly with the Fluormone/Tracer.
-If the free Fluormone/Tracer mP value is greater than 100 mP or negative, please refer to the user manual for your instrument and reset the G factor.
What is the best type of microplate reader for fluorescence polarization (FP) assays?
For FP assays, plate readers must specifically have FP built in. Please see our instrument compatibility portal (http://www.thermofisher.com/us/en/home/industrial/pharma-biopharma/drug-discovery-development/dd-misc/instrument-compatibility-portal.html).
How can I test the fluorescence polarization (FP) settings of my microplate reader before doing the assay?
We offer a FP One-Step Reference Kit (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/P3088) to detect in green (Ex/Em = 488/535 nm) and red (Ex/Em = 525/590 nm) emission ranges, suitable for the PolarScreen Green and Red Assays. The alternative is to perform the Controls in the respective assay kit prior to performing the actual assay using test compounds.