Kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red
Kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red
Kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red
Kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red
Kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red
Citations et références (62)
Invitrogen™

Kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red

Le kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red contient un dosage sensible et en une étape. IlAfficher plus
Have Questions?
RéférenceQuantité
A22188500 dosages
Référence A22188
Prix (EUR)
656,00
Each
Ajouter au panier
Quantité:
500 dosages
Prix (EUR)
656,00
Each
Ajouter au panier
Le kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red contient un dosage sensible et en une étape. Il utilise le réactif Amplex™ Red (10-acétyl-3,7-dihydroxyphénoxazine) pour détecter le peroxyde d’hydrogène (H2O2) ou une activité de la peroxydase. Le réactif Amplex™ Red, associé à la peroxydase de raifort (PR), a permis de détecter le H2O2 libéré à partir des échantillons biologiques, dont les cellules, ou généré dans les réactions couplées d’enzymes. Qui plus est, le réactif Amplex™ Red peut être utilisé comme un dosage ultra sensible pour l’activité de peroxydase lorsque H2O2 est excessif. En présence de peroxydase, le réactif Amplex™ Red réagit avec H2O2 dans un rapport stœchiométrique 1:1 pour créer le produit d’oxydation rouge fluorescent, à savoir la résorufine. La résorufine présente une excitation et une émission maximales d’environ 571 nm et 585 nm. Dans la mesure où le coefficient d’extinction est élevé (58 000 ± 5 000 cm–1M–1), vous pouvez effectuer le dosage de manière fluorométrique ou spectrophotométrique. Cette réaction a permis de détecter des quantités aussi infimes que 10 picomoles de H2O2 dans un volume de 100 µl ou 1 x 10 à 5 U/ml de HRP.

Caractéristiques du kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red :
• Ex / Em de la résorufine de réaction : Environ 571/585 nm
• Sensible en une étape pour détecter le peroxyde d’hydrogène ou la peroxydase in vitro
• Peut détecter aussi peu que 10 picomoles de peroxyde d’hydrogène ou 10 µU/ml d’activité peroxydase de raifort dans un volume de dosage de 100 µl
• Fournit des réactifs suffisants pour environ 500 dosages utilisant des volumes de réaction de 100 µL par dosages
• Conçu pour un lecteur de microplaques à fluorescence ou absorbance 96 puits, mais pouvant être facilement adapté à d’autres volumes, pour les fluorimètres et pour les spectrophotomètres

Trouver plus de substrats pour les oxydases
Voir Substrats pour les oxydases, y compris les kits Amplex Red—Section 10.5 dans le manuel Molecular Probes™ pour plus d’informations sur ces produits.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non utilisé à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantAutre(s) étiquette(s) ou colorant(s)
FormatTube(s), plaque à 96 puits
Quantité500 dosages
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
À utiliser avec (application)Test de la peroxydase d’hydrogène
À utiliser avec (équipement)Lecteur de microplaques, Spectrophotomètre, Fluorimètre
Gamme de produitsAmplex
Type de produitKit de dosage du peroxyde d’hydrogène/peroxydase
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver au congélateur (-5 à -30°C) à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I use the Amplex Red Hydrogen Peroxide/Peroxidase Assay Kit (Cat. No. A22188) to measure H2O2 from frozen cell culture supernatant?

We recommend using fresh samples that have not been frozen since H2O2 degrades over time and more readily in diluted form or in solutions that contain metal ions or natural antioxidants. For assaying cell culture supernatant, we would recommend analyzing samples as soon as possible.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Citations et références (62)

Citations et références
Abstract
Roles for the human ATP-dependent Lon protease in mitochondrial DNA maintenance.
Authors:Lu B,Yadav S,Shah PG,Liu T,Tian B,Pukszta S,Villaluna N,Kutejová E,Newlon CS,Santos JH,Suzuki CK
Journal:The Journal of biological chemistry
PubMed ID:17420247
Similar transition states mediate the Q-cycle and superoxide production by the cytochrome bc1 complex.
Authors:Forquer I,Covian R,Bowman MK,Trumpower BL,Kramer DM
Journal:The Journal of biological chemistry
PubMed ID:17008316
Overexpression of Na(+)/K (+)-ATPase parallels the increase in sodium transport and potassium recycling in an in vitro model of proximal tubule cellular ageing.
Authors:Silva E, Gomes P, Soares-da-Silva P,
Journal:J Membr Biol
PubMed ID:17334838
'Na(+)/K(+)-ATPase plays a key role in the transport of Na(+) throughout the nephron, but ageing appears to be accompanied by changes in the regulation and localization of the pump. In the present study, we examined the effect of in vitro cell ageing on the transport of Na(+) and K(+) ions ... More
Reactive oxygen species production via NADPH oxidase mediates TGF-beta-induced cytoskeletal alterations in endothelial cells.
Authors:Hu T, Ramachandrarao SP, Siva S, Valancius C, Zhu Y, Mahadev K, Toh I, Goldstein BJ, Woolkalis M, Sharma K
Journal:Am J Physiol Renal Physiol
PubMed ID:16159901
'Cytoskeletal alterations in endothelial cells have been linked to nitric oxide generation and cell-cell interactions. Transforming growth factor (TGF)-beta has been described to affect cytoskeletal rearrangement in numerous cell types; however, the underlying pathway is unclear. In the present study, we found that human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) have ... More
Subcellular localization of Nox4 and regulation in diabetes.
Authors:Block K, Gorin Y, Abboud HE,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:19706525
'Oxidative stress is implicated in human diseases. Some of the oxidative pathways are harbored in the mitochondria. NAD(P)H oxidases have been identified not only in phagocytic but also in somatic cells. Nox4 is the most ubiquitous of these oxidases and is a major source of reactive oxygen species (ROS) in ... More
View all Kit de dosage de peroxydase / peroxyde d’hydrogène Amplex™ Red citations