Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit

Comme les autres produits de la famille Cells-to-CT™, le kit TaqMan™ Cells-to-CT™ en 1 étape permet d’effectuer une analyse de l’expression directement à partir de cellules cultivées sans purification de l’ARN.

Ce nouvel ajout à la famille comprend un mélange TaqMan™ 1-Step RT-PCR Master Mix en 1 étape. Le format à tube unique de l’étape RT-PCR rationalise plus que jamais le flux de travail “de l’échantillon à la réponse”. La combinaison de la technologie de lyse Cells-to-CT™ simple avec la capacité de cycle rapide du mélange Master Mix RT-PCR en 1 étape permet d’obtenir plus rapidement des résultats grâce à une manipulation limitée des échantillons.

Le kit Cells-to-CT™ TaqMan™ en 1 étape est :
• Complet : le flux de travail optimisé comprend des réactifs de lyse cellulaire avec l’élimination de l’ADNg et le mélange TaqMan™ 1-Step RT-PCR Master Mix en 1 étape
• Plus rapide que jamais : la préparation d’échantillons de 7 minutes, y compris le traitement DNase, associée à une étape RT-PCR en temps réel de 28 minutes, permet un flux de travail de ∼ 35 minutes de l’échantillon à la réponse
• Simple : 10 étapes au total (préparation d’échantillons et RT-PCR en temps réel combinés)
• Robuste : réalisez l’analyse de l’expression génétique de 10 à 100 000 cellules par échantillon, résultats équivalents à ceux obtenus à partir de l’ARN purifié
• Pratique : contient suffisamment de réactifs pour effectuer 5 RT-PCR en temps réel pour chaque échantillon de cellules que vous préparez ; cela vous permet d’étudier plusieurs cibles ou d’effectuer des RT-PCR répliquées

Remarque : Les ensembles d’amorces / sondes TaqMan™ sont vendus séparément.

Préparation d’échantillons simple de 7 minutes, puis prêt pour la RT-PCR en temps réel
Que vous utilisiez des plaques ou des tubes, le kit TaqMan™ Cells-to-CT™ en 1 étape utilise une procédure simple de préparation des échantillons en 7 minutes. La technologie de lyse est conçue pour 10 à 100 000 cellules en culture / échantillon. Les cellules sont nettoyées dans du PBS et lysées en solution pendant 5 minutes à température ambiante avec un traitement simultané à la DNase. La lyse est terminée à température ambiante par une incubation de 2 minutes avec une solution d’arrêt. Le lysat est maintenant prêt à être analysé sur votre instrument de PCR en temps réel. Ajoutez-le simplement à un mélange Master Mix RT-PCR en temps réel contenant les ensembles d’amorces / sondes TaqMan™ présentant un intérêt. Le lysat peut également être conservé à –20°C. Étant donné que les échantillons peuvent être traités directement dans des puits de culture (96 ou 384 puits), la manipulation des échantillons et le risque de perte des échantillons ou d’erreur de transfert sont minimisés, ce qui contribue à un traitement à haut débit rapide. Contrairement aux anciens protocoles d’isolement de l’ARN en plusieurs étapes, aucune étape de chauffage, nettoyage ou centrifugation n’est nécessaire. Le kit simplifie considérablement un processus laborieux de 30 à 60 minutes et le réduit à 7 minutes.

Solution complète et validée
Tous les composants du kit Taqman™ Cells-to-CT™ en 1 étape ont été optimisés pour des performances constantes et fiables. Cela permet d’éviter le travail d’assemblage de la préparation séparée des échantillons et des mélanges Master Mix pour RT-PCR en temps réel en 1 étape. Pour une assurance qualité accrue, le kit TaqMan™ Cells-to-CT™ en 1 étape a été validé par des tests d’expression génétique TaqMan™ et présente des performances équivalentes à celles obtenues avec de l’ARN purifié.

Produit accessoire
Le kit de contrôle TaqMan™ Cells-to-CT™ a été conçu pour être utilisé avec les produits TaqMan™ Cells-to-CT™. Ce kit contient un contrôle endogène (ACTB) pour normaliser la variabilité du chargement des échantillons et un contrôle XenoRNA™ artificiel, ainsi qu’un dosage d’expression génétique TaqMan™ correspondant pour surveiller les effets de l’inhibition de la PCR.