Système d’expression Expi293™ MembranePro™
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Système d’expression Expi293™ MembranePro™

Pour les chercheurs qui étudient les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR)–et d’autres protéines membranaires, le système d’expression Expi293™ MembranePro™Afficher plus
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Pour les chercheurs qui étudient les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR)–et d’autres protéines membranaires, le système d’expression Expi293™ MembranePro™ fournit des protéines membranaires enrichies et fonctionnelles avec une efficacité, une évolutivité et une fiabilité élevées pour une grande variété d’applications à faible ou à haut débit.

Les fonctionnalités du système d’expression Expi293™ MembranePro™ comprennent :
•Efficacité—le rendement en protéines membranaires est multiplié par plus de 20 par rapport au système de culture adhérente
• Évolutivité—mise à l’échelle facile sans avoir besoin de plusieurs flacons
• Facile à utiliser—aucune dissociation enzymatique ou mécanique n’est nécessaire

En outre, les avantages de la technologie MembranePro™ sont les suivants :
•Les protéines sont affichées sur les membranes cellulaires humaines (ou d’autres mammifères)
• Le contrôle de la qualité cellulaire et le traitement post-traductionnel mammalien permettent de produire des protéines fonctionnelles
• Les protéines bourgeonnent sous forme de lipoparticules et sont facilement collectées dans le milieu de culture
• Les lipoparticules sont enrichies en récepteurs exprimés

Avec le protocole du système d’expression Expi293™ MembranePro™, qui demande moins de travail, vous pourrez :
1.Cloner votre gène d’intérêt à l’aide d’un vecteur TOPO™
2.Transfecter une culture de suspension des cellules Expi293F™ à l’aide du réactif de transfection Expifectamine™ 293
3.Récolter les lipoparticules 48 heures après l’ajout d’activateurs à l’aide du mélange de précipitation MembranePro™
4.Stocker les lipoparticles à -80 C ou passer aux dosages en aval

Remarque :Les cellules Expi293F™ (A14527) et un kit d’expression pEF6 V5-His TOPO™ (K9610-20) sont requis pour utiliser ce système et doivent être achetés séparément si nécessaire.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
Lignée cellulaireExpi293F™
Type de livraisonParticules virales (VLP)
À utiliser avec (application)Expression de protéines membranaires
Gamme de produitsExpi293, MembranePro
Quantité100 réactions
Suffisant pour100 réactions
AccélérateurEF-1α
TypeSystème d’expression
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• MembranePro™ Reagent, 10 x 0.3 mg (1 mg/mL), store at -5 to -30°C
• MembranePro™ Precipitation Mix, 10 x 75 mL, store at room temperature
• 10 ExpiFectamine™ 293 transfection kits (containing reagent and enhancers) each for 1 L of culture, store at 2–8°C
• Opti-MEM™ I Reduced Serum Medium, 10 x 100 mL, store at 2–8°C
• Expi293™ Expression Medium, 10 x 1 L, store in the dark at 2–8°C

Foire aux questions (FAQ)

The Expi293F cells supplied with the Expi293 MembranePro Expression System had poor viability upon thawing. Can I use a different cell line?

While other cell lines can be tested, we recommend using the Expi293F cells, as the performance of the kit has been optimized for use with this cell line (i.e., transfection efficiency using ExpiFectamine Transfection Reagent).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

Can I use a different expression vector with the MembranePro Functional Protein Expression Kit or the Expi293 MembranePro Expression System?

While other expression vectors and promoters can be tested, we recommend using the pEF6 V5-His TOPO TA expression vector for optimal yields, as the performance of these kits has been optimized for use with this expression vector containing the EF-1alpha promoter.

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Is there a positive control included with the MembranePro Functional Protein Expression Kit or the Expi293 MembranePro Expression System?

No. However, you can visually tell if MembranePro particles formed via a pellet at the bottom of the tube following precipitation. You can also test the function of your MembranePro particles via receptor-ligand binding studies.

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I am interested in expressing some functional membrane proteins in mammalian cells. Do you offer a system that will allow me to do this?

We offer the MembranePro Functional Protein Expression System for the expression and display of mammalian cell surface membrane proteins, including G-protein coupled receptors (GPCRs), in an aqueous-soluble format. The system uses virus-like particles (VLPs) to capture lipid raft regions of the cell’s plasma membrane as the VLPs are secreted from the cell. Using this system, it is possible to capture and display endogenous or overexpressed GPCRs and other cell surface membrane proteins in their native context for downstream assays. Since the VLPs are packaged by the cell and secreted into the culture medium, VLPs allow for the isolation of functional membrane proteins by simply decanting and clarifying the culture medium, and isolating the VLPs by precipitation. This represents a substantial savings in time, effort, and required machinery over preparing cell membrane fractions. Because VLPs capture receptor-rich regions of the plasma membrane, your GPCR may also be substantially enriched over crude membrane preparations.

The standard MembranePro Functional Protein Expression System is offered in two configurations: The MembranePro Functional Protein Expression Kit (Cat. No. A11667), which provides the convenience of a complete kit with all the reagents supplied for 10 reactions, and the MembranePro Functional Protein Support Kit, which includes the reagents for functional expression of membrane proteins but does not contain the expression vector cloning module or the 293FT host cells. The MembranePro Functional Protein Support Kit is offered in three sizes, allowing 10, 60, or 600 reactions (Cat. Nos. A11668, A11669, A11670, respectively).

For high-yield expression of functional membrane proteins in Exp293F cells, we offer the Expi293 MembranePro Expression System (Cat. Nos. A25869, A25870) that combines the scalability and ease of use of Expi293 and the technology of MembranePro to allow an increase of more than 20-fold in membrane protein yield compared to the standard, adherent culture MembranePro Functional Protein Expression System. Please see the Application Note for more details.

Note: Expi293F cells (Cat. No. A14527) and pEF6 V5 His TOPO Expression Vector Kit (Cat. No. K961020) are not supplied with the Expi293 MembranePro Expression System and have to be purchased separately as required.

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I have misplaced the pEF6 V5-His TOPO TA expression vector from the Expi293 MembranePro Expression System. Can I use a different expression vector?

While other expression vectors and promoters can be tested, we recommend using the pEF6 V5-His TOPO TA expression vector for optimal yields, as the performance of the kit has been optimized for use with this expression vector containing the EF-1alpha promoter.

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