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Citations et références (16)
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Alexa Fluor™ 405 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
L’Alexa Fluor™ 405 est un colorant fluorescent bleu dont l’utilisation est optimale avec le laser violet de 405 nm. UtiliséAfficher plus
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| Référence | Quantité |
|---|---|
| A30000 | 1 mg |
| A30100 également connu sous le numéro A-30100 | 5 mg |
Référence A30000
Prix (EUR)
710,00
Each
Quantité:
1 mg
Prix (EUR)
710,00
Each
L’Alexa Fluor™ 405 est un colorant fluorescent bleu dont l’utilisation est optimale avec le laser violet de 405 nm. Utilisé pour une génération de signal stable en imagerie et en cytométrie de flux, le colorant Alexa Fluor™ 405 est hydrosoluble et insensible au pH de pH 4 à pH 10. En plus de formulations de colorants réactifs, nous proposons le colorant Alexa Fluor™ 405 conjugué à divers anticorps, peptides, protéines, traceurs et substrats d’amplification optimisés pour le marquage et la détection de cellules (en savoir plus).
L’ester NHS (ou ester de succinimidyle) Alexa Fluor™ 405 est l’outil le plus populaire pour conjuguer le colorant à une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH2) de protéines, d’oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Le conjugué Alexa Fluor™ qui en résulte présente une plus grande fluorescence et une meilleure photostabilité que les conjugués d’autres fluorophores spectralement similaires.
Pour plus d’informations sur cet ester AlexaFluor™ NHS :
marquage du fluorophore : Colorant Alexa Fluor™ 405
Groupe de réactifs : Ester NHS
Réactivité : Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
Ex/Em du conjugué : 400/424 nm
Coefficient d’extinction : 35 000 cm-1M-1
Colorants similaires sur le plan spectral : bleu pacifique
Poids moléculaire : 1028.3
Réaction de conjugaison classique
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous vous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, à l’aide de trois rapports molaires différents entre le réactif et la protéine.
L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1–0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Étant donné que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino de lysine epsilon, vous pouvez obtenir un marquage plus sélectif du terminus d’amine en utilisant un tampon plus proche du pH neutre.
Purification de conjugués
Les anticorps marqués sont généralement séparés du colorant Alexa Fluor™ libre à l’aide d’une colonne de filtration sur gel, telle que Sephadex™ G-25, Biogel™ P-30 ou équivalent. Pour des protéines beaucoup plus grandes ou plus petites, sélectionnez un milieu de filtration sur gel ayant un seuil de poids moléculaire approprié ou purifiez par dialyse. Nous proposons plusieurs kits de purification optimisés pour différentes quantités de conjugués d’anticorps :
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 0,5 à 1 mg (A33086)
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 20 à 50 µg (A33087)
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 50 à 100 µg (A33088)
En savoir plus sur le marquage des protéines et des anticorps
Nous offrons une large sélection de kits de marquage d’anticorps et de protéines de Molecular Probes™ pour convenir à votre produit de départ et à votre configuration expérimentale. Consultez nos kits de marquage d’anticorps ou utilisez notre outil de sélection de chimie de marquage pour d’autres choix. Pour en savoir plus sur nos kits de marquage, lisez Kits de marquage des protéines et des acides nucléiques, section 1.2 dans le manuel Molecular Probes™.
Nous vous préparerons un conjugué sur mesure
Si vous ne trouvez pas ce que vous cherchez dans notre catalogue en ligne, nous vous préparerons un conjugué d’anticorps ou de protéines sur mesure. Notre service de conjugaison personnalisé est efficace et confidentiel, et nous croyons en la qualité de notre travail. Nous sommes certifiés ISO 9001:2000.
L’ester NHS (ou ester de succinimidyle) Alexa Fluor™ 405 est l’outil le plus populaire pour conjuguer le colorant à une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH2) de protéines, d’oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Le conjugué Alexa Fluor™ qui en résulte présente une plus grande fluorescence et une meilleure photostabilité que les conjugués d’autres fluorophores spectralement similaires.
Pour plus d’informations sur cet ester AlexaFluor™ NHS :
marquage du fluorophore : Colorant Alexa Fluor™ 405
Groupe de réactifs : Ester NHS
Réactivité : Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
Ex/Em du conjugué : 400/424 nm
Coefficient d’extinction : 35 000 cm-1M-1
Colorants similaires sur le plan spectral : bleu pacifique
Poids moléculaire : 1028.3
Réaction de conjugaison classique
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous vous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, à l’aide de trois rapports molaires différents entre le réactif et la protéine.
L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1–0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Étant donné que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino de lysine epsilon, vous pouvez obtenir un marquage plus sélectif du terminus d’amine en utilisant un tampon plus proche du pH neutre.
Purification de conjugués
Les anticorps marqués sont généralement séparés du colorant Alexa Fluor™ libre à l’aide d’une colonne de filtration sur gel, telle que Sephadex™ G-25, Biogel™ P-30 ou équivalent. Pour des protéines beaucoup plus grandes ou plus petites, sélectionnez un milieu de filtration sur gel ayant un seuil de poids moléculaire approprié ou purifiez par dialyse. Nous proposons plusieurs kits de purification optimisés pour différentes quantités de conjugués d’anticorps :
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 0,5 à 1 mg (A33086)
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 20 à 50 µg (A33087)
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 50 à 100 µg (A33088)
En savoir plus sur le marquage des protéines et des anticorps
Nous offrons une large sélection de kits de marquage d’anticorps et de protéines de Molecular Probes™ pour convenir à votre produit de départ et à votre configuration expérimentale. Consultez nos kits de marquage d’anticorps ou utilisez notre outil de sélection de chimie de marquage pour d’autres choix. Pour en savoir plus sur nos kits de marquage, lisez Kits de marquage des protéines et des acides nucléiques, section 1.2 dans le manuel Molecular Probes™.
Nous vous préparerons un conjugué sur mesure
Si vous ne trouvez pas ce que vous cherchez dans notre catalogue en ligne, nous vous préparerons un conjugué d’anticorps ou de protéines sur mesure. Notre service de conjugaison personnalisé est efficace et confidentiel, et nous croyons en la qualité de notre travail. Nous sommes certifiés ISO 9001:2000.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Réactivité chimiqueAmine
Méthode de détectionFluorescent
Émission421 nm
Excitation401 nm
Faisceaux laser du cytomètre en flux405 nm
Marqueur ou colorantAlexa Fluor™ 405
Type de produitColorant
Quantité1 mg
Groupement de réactifsEster actif, ester de succinimidyle
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
SolubilitéDMSO (diméthylsulfoxyde)
Type d’étiquetteColorants Alexa Fluor
Gamme de produitsAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contient 1 flacon (1 mg). Conserver au congélateur (-5 à -30°C) à l’abri de la lumière.
Foire aux questions (FAQ)
I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?
I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?
Is Alexa Fluor 405 dye the best dye for imaging with a 405 nm laser?
Citations et références (16)
Citations et références
Abstract
3D multicolor super-resolution imaging offers improved accuracy in neuron tracing.
Journal:PLoS One
PubMed ID:22292051
'The connectivity among neurons holds the key to understanding brain function. Mapping neural connectivity in brain circuits requires imaging techniques with high spatial resolution to facilitate neuron tracing and high molecular specificity to mark different cellular and molecular populations. Here, we tested a three-dimensional (3D), multicolor super-resolution imaging method, stochastic
Preparation of photoswitchable labeled antibodies for STORM imaging.
Journal:
PubMed ID:23734027
'Stochastic optical reconstruction microscopy (STORM) is a method for superresolution fluorescence imaging based on the high accuracy localization of individual fluorophores. It uses optically switchable fluorophores: molecules that can be switched between a nonfluorescent and a fluorescent state by exposure to light. Many synthetic fluorescent dye molecules show photoswitchable fluorescence
CD8 T cell competition for dendritic cells in vivo is an early event in activation.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16880405
'T cell responses against an antigen are often focused on a small fraction of potentially immunogenic determinants, a phenomenon known as immunodominance. Immunodominance can be established at several stages of antigen presentation, including antigen processing, binding of peptides to MHC, and competition between T cells for dendritic cells (DCs). The
Fast, three-dimensional super-resolution imaging of live cells.
Journal:Nat Methods
PubMed ID:21552254
'We report super-resolution fluorescence imaging of live cells with high spatiotemporal resolution using stochastic optical reconstruction microscopy (STORM). By labeling proteins either directly or via SNAP tags with photoswitchable dyes, we obtained two-dimensional (2D) and 3D super-resolution images of living cells, using clathrin-coated pits and the transferrin cargo as model
Superresolution imaging of chemical synapses in the brain.
Journal:Neuron
PubMed ID:21144999
'Determination of the molecular architecture of synapses requires nanoscopic image resolution and specific molecular recognition, a task that has so far defied many conventional imaging approaches. Here, we present a superresolution fluorescence imaging method to visualize the molecular architecture of synapses in the brain. Using multicolor, three-dimensional stochastic optical reconstruction