Conjugués de l’annexine V pour la détection de l’apoptose
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Conjugués de l’annexine V pour la détection de l’apoptose

Détectez les premiers stades de l’apoptose avec annexine V Alexa Fluor autonome, APC, Pacific Blue, PE, FITC, conjugués à la biotine au moyen de la cytométrie en flux.
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RéférenceExcitation / émissionFaisceaux laser du cytomètre en fluxConjugué
A35111565/578488, 532, 561PE
A13201495/519488Alexa Fluor 488
A13199494/518488FITC
A13202578/603532, 561Alexa Fluor 568
A13203590/617532Alexa Fluor 594
A13204Biotine-X
A23202346/442UVAlexa Fluor 350
A23204650/665633-637Alexa Fluor 647
A35108555/565532, 561Alexa Fluor 555
A35109679/702633-637Alexa Fluor 680
A35110650/660633-637APC (Allophycocyanine)
A35122410/455405Pacific Blue
Référence A35111
Prix (EUR)
664,00
Each
Excitation / émission:
565/578
Faisceaux laser du cytomètre en flux:
488, 532, 561
Conjugué:
PE
Prix (EUR)
664,00
Each
Parvenez à une détection rapide et fiable de l’apoptose cellulaire précoce grâce aux conjugués autonomes de l’annexine V pour la détection de l’apoptose. Les conjugués de l’annexine V offrent une différence jusqu’à 100 fois maximum dans l’intensité du signal de fluorescence entre les cellules apoptotiques et non apoptotiques au moyen de la cytométrie en flux.
L’annexine V présente une forte affinité pour la phosphatidylsérine (PS), qui devient exposée sur le feuillet externe des cellules soumises à l’apoptose. En raison de cette affinité, les réactifs V d’annexine V marqués par fluorescence sont couramment utilisés dans les recherches sur l’apoptose.

Les conjugués d’annexine V constituent une méthode de détection rapide et fiable pour l’étude de l’externalisation de la phosphatidylsérine, un indicateur des étapes intermédiaires de l’apoptose. La différence d’intensité de fluorescence entre les cellules apoptotiques et non apoptotiques colorées avec nos conjugués d’annexine V fluorescents, mesurés par cytométrie en flux, est généralement 100 fois supérieure environ.

En collaboration avec Nexins Research BV, nous fournissons les conjugués d’annexine V les plus brillants et de la meilleure qualité du marché, notamment les conjugués d’annexine V Alexa Fluor 350, 488, 555, 568, 594, 647 et 680, ainsi que les conjugués d’annexine V APC, Biotine-X, FITC, Pacific Blue et PE. Les conjugués d’annexine V hautement fluorescents constituent une méthode de détection rapide et fiable pour l’étude de l’externalisation de la phosphatidylsérine, un des indicateurs les plus précoces de l’apoptose.

Le conjugué d’annexine V Pacific Blue est excitable par le violet et est donc idéal pour les instruments à laser violet et pour les expériences multicolores qui incluent des colorants fluorescents verts ou rouges.

Les avantages de nos conjugués d’annexine V sont les suivants :
• Conjugué aux colorants Invitrogen Alexa Fluor et eFluor pour des signaux plus brillants
• Conjugués pour tous les lasers disponibles
• Disponibles en tant que réactifs autonomes ou kits faciles à utiliser

La coloration à l’annexine V pour détecter les cellules apoptotiques ne peut être effectuée que sur des cellules vivantes et des tissus. Si les échantillons doivent être fixés après coloration, des conditions spécifiques sont nécessaires pour obtenir une rétention transitoire du signal. Il s’agit notamment d’utiliser une méthode de fixation sans alcool et à base d’aldéhyde, d’utiliser des tampons contenant du Ca2+ et d’éviter des surfactants/détergents. Pour vous vous faciliter la tâche, nous proposons également un tampon de liaison à l’annexine concentrée qui facilite la liaison de l’annexine V à la phosphatidylsérine dans les dosages d’apoptose.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
CouleurRouge
DescriptionConjugué Annexine V PE (Annexine V R-PE) (remplace le produit Annexine-Annexine V04)
Excitation / émission565/578
Faisceaux laser du cytomètre en flux488, 532, 561
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux
FormeSolution
Contenus des kitsContient 1 flacon d’annexine V, conjugué R-PE.
Nbre de réactions50
Type de produitConjugué d’anexine V
Quantité250 μL
Conditions d’expéditionGlace humide
ConjuguéPE
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver au réfrigérateur (2°C à 8°C) et à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I fix my cells after annexin V staining?

Yes, this is possible. We have established protocols for annexin V staining combined with intracellular staining of lymphocytes that can be found here. The most important step is to leave some binding buffer in the suspension when fixation is started. Compared to staining of live cells, the intensity of the annexin V signal may be somewhat reduced.

I am trying to label adherent cells with annexin V and am finding that everything is getting labeled. How can I fix this?

Treating cells with trypsin or other reagents to detach adherent cells causes damage to the membrane, such that cells will be labeled with annexin V. The best way to avoid this problem is to allow your cells to recover for 30-45 min in the incubator. Swirl the tube/plate/flask every few minutes to prevent re-attachment. After this recovery period, you can label your cells with annexin V and analyze by flow cytometry.

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Citations et références (21)

Citations et références
Abstract
Human fetal retinal pigment epithelial cells induce apoptosis in the T-cell line Jurkat.
Authors:Farrokh-Siar L, Rezai KA, Semnani RT, Patel SC, Ernest JT, Peterson EJ, Koretzky GA, van Seventer GA
Journal:Invest Ophthalmol Vis Sci
PubMed ID:10359333
'PURPOSE: To investigate the mechanism(s) involved in human fetal retinal pigment epithelium (HFRPE)-mediated T-cell death. METHODS: Pure HFRPE cells were isolated and cultured. Normal and interferon (IFN)-gamma-activated HFRPE from early and late in vitro passages were incubated with cells from the human T-cell leukemia line Jurkat (Jkt). Cultures were pulsed ... More
High-resolution mapping reveals topologically distinct cellular pools of phosphatidylserine.
Authors:Fairn GD, Schieber NL, Ariotti N, Murphy S, Kuerschner L, Webb RI, Grinstein S, Parton RG,
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:21788369
'Phosphatidylserine (PS) plays a central role in cell signaling and in the biosynthesis of other lipids. To date, however, the subcellular distribution and transmembrane topology of this crucial phospholipid remain ill-defined. We transfected cells with a GFP-tagged C2 domain of lactadherin to detect by light and electron microscopy PS exposed ... More
Cigarette smoke extract induces oxidative stress and apoptosis in human lung fibroblasts.
Authors:Carnevali S, Petruzzelli S, Longoni B, Vanacore R, Barale R, Cipollini M, Scatena F, Paggiaro P, Celi A, Giuntini C
Journal:Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol
PubMed ID:12547733
'Cigarette smoke is a mixture of chemicals having direct and/or indirect toxic effects on different lung cells. We investigated the effect of cigarette smoke on human lung fibroblasts (HFL-1) oxidation and apoptosis. Cells were exposed to various concentrations (1, 5, and 10%) of cigarette smoke extract (CSE) for 3 h, ... More
Pseudomonas aeruginosa-induced apoptosis is defective in respiratory epithelial cells expressing mutant cystic fibrosis transmembrane conductance regulator.
Authors:Cannon CL, Kowalski MP, Stopak KS, Pier GB
Journal:Am J Respir Cell Mol Biol
PubMed ID:12878584
'Chronic lung infection with Pseudomonas aeruginosa constitutes the most severe manifestation of cystic fibrosis, a scenario that results from defects in early clearance of the microbe. Early clearance involves epithelial cell ingestion of bacteria, rapid activation of nuclear factor-kappa B and cellular desquamation within minutes of P. aeruginosa infection, processes ... More
N- and O-glycans modulate galectin-1 binding, CD45 signaling, and T cell death.
Authors:Earl LA, Bi S, Baum LG,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:19920154
'Galectin-1, a beta-galactoside-binding protein highly expressed in the thymus, induces apoptosis of specific thymocyte subsets and activated T cells. Galectin-1 binds to N- and O-glycans on several glycoprotein receptors, including CD7, CD43, and CD45. Here we show that galectin-1 signaling through CD45, which carries both N- and O-glycans, is regulated ... More