Conjugués de l’annexine V pour la détection de l’apoptose
Conjugués de l’annexine V pour la détection de l’apoptose
Invitrogen™

Conjugués de l’annexine V pour la détection de l’apoptose

Détectez les premiers stades de l’apoptose avec annexine V Alexa Fluor autonome, APC, Pacific Blue, PE, FITC, conjugués à la biotine au moyen de la cytométrie en flux.
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RéférenceExcitation / émissionFaisceaux laser du cytomètre en fluxConjugué
A35122410/455405Pacific Blue
A13201495/519488Alexa Fluor 488
A13199494/518488FITC
A13202578/603532, 561Alexa Fluor 568
A13203590/617532Alexa Fluor 594
A13204Biotine-X
A23202346/442UVAlexa Fluor 350
A23204650/665633-637Alexa Fluor 647
A35108555/565532, 561Alexa Fluor 555
A35109679/702633-637Alexa Fluor 680
A35110650/660633-637APC (Allophycocyanine)
A35111565/578488, 532, 561PE
Référence A35122
Prix (EUR)
483,65
Online Exclusive
644,00
Économisez 160,35 (25%)
Each
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Excitation / émission:
410/455
Faisceaux laser du cytomètre en flux:
405
Conjugué:
Pacific Blue
Prix (EUR)
483,65
Online Exclusive
644,00
Économisez 160,35 (25%)
Each
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Parvenez à une détection rapide et fiable de l’apoptose cellulaire précoce grâce aux conjugués autonomes de l’annexine V pour la détection de l’apoptose. Les conjugués de l’annexine V offrent une différence jusqu’à 100 fois maximum dans l’intensité du signal de fluorescence entre les cellules apoptotiques et non apoptotiques au moyen de la cytométrie en flux.
L’annexine V présente une forte affinité pour la phosphatidylsérine (PS), qui devient exposée sur le feuillet externe des cellules soumises à l’apoptose. En raison de cette affinité, les réactifs V d’annexine V marqués par fluorescence sont couramment utilisés dans les recherches sur l’apoptose.

Les conjugués d’annexine V constituent une méthode de détection rapide et fiable pour l’étude de l’externalisation de la phosphatidylsérine, un indicateur des étapes intermédiaires de l’apoptose. La différence d’intensité de fluorescence entre les cellules apoptotiques et non apoptotiques colorées avec nos conjugués d’annexine V fluorescents, mesurés par cytométrie en flux, est généralement 100 fois supérieure environ.

En collaboration avec Nexins Research BV, nous fournissons les conjugués d’annexine V les plus brillants et de la meilleure qualité du marché, notamment les conjugués d’annexine V Alexa Fluor 350, 488, 555, 568, 594, 647 et 680, ainsi que les conjugués d’annexine V APC, Biotine-X, FITC, Pacific Blue et PE. Les conjugués d’annexine V hautement fluorescents constituent une méthode de détection rapide et fiable pour l’étude de l’externalisation de la phosphatidylsérine, un des indicateurs les plus précoces de l’apoptose.

Le conjugué d’annexine V Pacific Blue est excitable par le violet et est donc idéal pour les instruments à laser violet et pour les expériences multicolores qui incluent des colorants fluorescents verts ou rouges.

Les avantages de nos conjugués d’annexine V sont les suivants :
• Conjugué aux colorants Invitrogen Alexa Fluor et eFluor pour des signaux plus brillants
• Conjugués pour tous les lasers disponibles
• Disponibles en tant que réactifs autonomes ou kits faciles à utiliser

La coloration à l’annexine V pour détecter les cellules apoptotiques ne peut être effectuée que sur des cellules vivantes et des tissus. Si les échantillons doivent être fixés après coloration, des conditions spécifiques sont nécessaires pour obtenir une rétention transitoire du signal. Il s’agit notamment d’utiliser une méthode de fixation sans alcool et à base d’aldéhyde, d’utiliser des tampons contenant du Ca2+ et d’éviter des surfactants/détergents. Pour vous vous faciliter la tâche, nous proposons également un tampon de liaison à l’annexine concentrée qui facilite la liaison de l’annexine V à la phosphatidylsérine dans les dosages d’apoptose.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
CouleurBleu
DescriptionAnnexine V, conjugué Pacific Blue, pour cytométrie en flux
Excitation / émission410/455
Faisceaux laser du cytomètre en flux405
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux
Contenus des kitsContient 1 flacon de conjugué d’annexine V Pacific Blue.
Nbre de réactions100
Type de produitConjugué d’anexine V
Quantité500 μL
Conditions d’expéditionGlace humide
ConjuguéPacific Blue
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver au réfrigérateur (2°C à 8°C) et à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

I want to study apoptosis using an Annexin V conjugate, but with adherent cells via microscopy instead of flow cytometry. Can this be done?

It has been done, but we don‘t recommend it. Both healthy cells and apoptotic cells possess phosphatidylserine on the cell surface, which can be detected with Annexin V, but apoptotic cells have significantly more of it. You can easily tell the difference between these two populations with flow cytometry, because flow cytometers are more sensitive and have a higher throughput. But with a microscope, you cannot always tell the difference, especially for adherent cells. Instead, for microscopy, we recommend a different technique, such as detecting caspases with CellEvent Caspase Detection Reagents.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I fix my cells after annexin V staining?

Yes, this is possible. We have established protocols for annexin V staining combined with intracellular staining of lymphocytes that can be found here. The most important step is to leave some binding buffer in the suspension when fixation is started. Compared to staining of live cells, the intensity of the annexin V signal may be somewhat reduced.

Citations et références (9)

Citations et références
Abstract
Hepatitis B virus X protein targets Bcl-2 proteins to increase intracellular calcium, required for virus replication and cell death induction.
Authors:Geng X, Huang C, Qin Y, McCombs JE, Yuan Q, Harry BL, Palmer AE, Xia NS, Xue D,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:23091012
'Infection with the hepatitis B virus (HBV) promotes the development of hepatitis, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma (HCC) and is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. HBV X protein (HBx) is an important effector for HBV pathogenesis, but its cellular targets and acting mechanisms remain elusive. We show here ... More
Live attenuated lentivirus infection elicits polyfunctional simian immunodeficiency virus Gag-specific CD8+ T cells with reduced apoptotic susceptibility in rhesus macaques that control virus replication after challenge with pathogenic SIVmac239.
Authors:Genescà M, Rourke T, Li J, Bost K, Chohan B, McChesney MB, Miller CJ,
Journal:J Immunol
PubMed ID:17878372
'HIV-specific CD8+ T cells that secrete multiple cytokines in response to Ag stimulation are associated with the control of virus replication during chronic HIV infection. To determine whether the presence of polyfunctional CD8+ T cell responses distinguishes protected and unprotected monkeys in a live attenuated lentivirus model, SIV Gag peptide-specific ... More
A novel method for long term bone marrow culture and genetic modification of murine neutrophils via retroviral transduction.
Authors:Zemans RL, Briones N, Young SK, Malcolm KC, Refaeli Y, Downey GP, Worthen GS,
Journal:J Immunol Methods
PubMed ID:19010330
'Neutrophils are a critical component of the innate immune response to invading microbial pathogens. However, an excessive and/or prolonged neutrophil response can result in tissue injury that is thought to underlie the pathogenesis of various inflammatory diseases. The development of novel therapeutic strategies for inflammatory diseases depends on an improved ... More
Modified vaccinia virus Ankara-based vaccine vectors induce apoptosis in dendritic cells draining from the skin via both the extrinsic and intrinsic caspase pathways, preventing efficient antigen presentation.
Authors:Guzman E, Cubillos-Zapata C, Cottingham MG, Gilbert SC, Prentice H, Charleston B, Hope JC,
Journal:J Virol
PubMed ID:22419811
'Dendritic cells (DC) are potent antigen-presenting cells and central to the induction of immune responses following infection or vaccination. The collection of DC migrating from peripheral tissues by cannulation of the afferent lymphatic vessels provides DC which can be used directly ex vivo without extensive in vitro manipulations. We have ... More
The phosphatidylinositol-3-kinase inhibitor NVP-BKM120 overcomes resistance signals derived from microenvironment by regulating the Akt/FoxO3a/Bim axis in chronic lymphocytic leukemia cells.
Authors:Rosich L, Saborit-Villarroya I, López-Guerra M, Xargay-Torrent S, Montraveta A, Aymerich M, Villamor N, Campo E, Pérez-Galán P, Roué G, Colomer D,
Journal:
PubMed ID:23850807
Phosphatidylinositol-3-kinase pathway is constitutively activated in chronic lymphocytic leukemia mainly due to microenvironment signals, including stromal cell interaction and CXCR4 and B-cell receptor activation. Because of the importance of phosphatidylinositol-3-kinase signaling in chronic lymphocytic leukemia, we investigated the activity of the NVP-BKM120, an orally available pan class I phosphatidylinositol-3-kinase inhibitor. ... More