TaqMan™ Fast Advanced Cells-to-CT™ Kit

Le kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct est un système complet de lysat cellulaire conçu pour l’analyse de l’expression génétique directement à partir de cellules cultivées sans purification d’ARN. Les réactifs de lyse cellulaire TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct sont fournis avec un mélange enzymatique de transcription inverse Fast Advanced de la plus haute sensibilité, un tampon RT 2x et un mélange maître TaqMan Fast Advanced Master Mix de meilleure qualité. Le kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct vous offre toute la sensibilité dont vous avez besoin dans le flux de travail le plus rapide disponible : obtenez les résultats d’analyse des expressions génétiques d’une plaque complète de cellules en environ 80 minutes.

• Complet : le flux de travail optimisé comprend des réactifs de lyse cellulaire avec élimination de l’ADNg, un nouveau mélange enzymatique de RT Fast Advanced, un tampon et le nouveau mélange TaqMan Fast Advanced Master Mix
• Rapide : préparation des échantillons en 7 minutes, y compris le traitement DNase, à température ambiante
• Facile : effectuez la lyse des échantillons dans un tube ou directement dans des plaques de culture
• Robuste : réalisez l’analyse de l’expression génétique de 10 à 100 000 cellules par échantillon, résultats équivalents à ceux obtenus à partir de l’ARN purifié
• Efficace : contient suffisamment de réactifs pour générer 500 résultats de PCR en temps réel à partir de 100 échantillons de départ

Une méthode unique élimine le besoin d’isoler l’ARN des cellules cultivées
La méthode Cells-to-Ct comprend un réactif de lyse unique qui lyse les cellules et protège l’ARN. L’élimination de l’ADN se produit simultanément à l’étape de lyse de 5 minutes pour gagner du temps et améliorer la facilité d’utilisation. La lyse est ensuite arrêtée par l’ajout d’une “solution d’arrêt” qui se lie de façon irréversible aux réactifs de lyse.

Le kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT contient des réactifs de transcription inverse (RT) pour la synthèse d’ADNc et le mélange TaqMan Fast Advanced Master Mix pour l’analyse PCR en temps réel. Les ensembles d’amorces / sondes TaqMan sont vendus séparément.

Préparation des échantillons simple en 7 minutes
Le kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT est conçu pour 10 à 100 000 cellules en culture / échantillon. Les cellules sont nettoyées dans du PBS et lysées dans une solution pendant cinq minutes à température ambiante ; le traitement par DNase peut être réalisé simultanément. La lyse est terminée à température ambiante par une incubation de 2 minutes avec une solution d’arrêt. Les lysats sont maintenant prêts pour la transcription inverse ou la conservation à –20°C pour un court terme ou -80°C pour un long terme.

Maximisez la sensibilité de la détection
Contrairement à certains kits concurrents qui limitent la quantité de lysat dans la réaction de RT à 10 %, le kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT peut accueillir 45 % du volume total de la réaction de RT sous forme de lysat cellulaire. En outre, l’ADNc peut composer jusqu’à 45 % du volume de réaction de PCR en temps réel. Le grand volume de lysat dans la réaction RT optimisée, associé à un grand volume d’ADNc lors de la PCR en temps réel subséquente qui utilise le mélange TaqMan Fast Advanced Master Mix, mène à une sensibilité maximale. Le Master Mix amplifie la cible avec précision et exactitude, ce qui permet de détecter de petites quantités de cibles, telles que les transcrits exprimés à de faibles niveaux.

Réduction des pertes d’échantillons et des erreurs de transfert
Étant donné que les échantillons peuvent être traités directement dans des puits de culture (96 ou 384 puits), la manipulation des échantillons et le risque de perte des échantillons ou d’erreur de transfert sont minimisés, ce qui contribue à un traitement à haut débit rapide. Contrairement aux anciens protocoles d’isolement de l’ARN en plusieurs étapes, aucune étape de chauffage, nettoyage ou centrifugation n’est nécessaire. Le kit simplifie considérablement un processus laborieux de 30–60 minutes et le réduit à 7 minutes.

Compatible avec les dosages d’expression génétique TaqMan de référence
Le flux de travail du kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT permet une évaluation d’expression génétique inégalée avec l’un des >700 000 dosages d’expression génétique TaqMan. Ce kit a été largement testé pour sa spécificité grâce à une large sélection de dosages d’expression génétique TaqMan.

Performances éprouvées, éprouvées ensemble
Tous les composants du kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT ont été optimisés pour des performances constantes et fiables. Cela permet d’éliminer toute conjecture liée à l’assemblage des différentes préparations d’échantillons, de la RT et des kits de PCR en temps réel. Et le kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT a été validé avec les dosages d’expression génétique TaqMan pour une meilleure assurance de la qualité, vous offrant la sensibilité dont vous avez besoin avec le flux de travail de l’échantillon à la réponse le plus rapide disponible.