Kit de quantification de bibliothèque Collibri™
Invitrogen™

Kit de quantification de bibliothèque Collibri™

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Le kit de quantification de la bibliothèque Invitrogen Collibri comprend un Master Mix prêt à l’emploi optimisé pour la quantification de la bibliothèque Illumina NGS et un tampon de dilution de la bibliothèque. Le mélange Collibri Library Quantification Master Mix comprend l’ADN polymérase Platinum II Taq à démarrage à chaud et permet une quantification pratique et précise des bibliothèques NGS. Le Master Mix contient tous les composants nécessaires à la réaction d’amplification, y compris les amorces et le colorant de référence passive, et ne nécessite aucune préparation avant utilisation. En raison de la concentration universelle du colorant de référence passive dans le Master Mix, le kit peut être utilisé avec n’importe quel instrument qPCR sans ajustement.

Caractéristique du kit de quantification de la bibliothèque Collibri :
Quantification précise des bibliothèques faites à partir de différents types d’échantillons, y compris les échantillons dégradés
Facile à utiliser avec tous les composants prêts à l’emploi : aucune préparation de réactifs requise
Repères visuels : colorants spécialement formulés inclus pour suivre les étapes de pipetage
Technologie de démarrage à chaud Platinum : spécificité, sensibilité et configuration de réaction à température ambiante supérieures

Commodité inégalée
Le mélange Collibri Library Quantification Master Mix contient de l’ADN polymérase Platinum II Taq à démarrage à chaud, un tampon optimisé, des dNTP, des séquences d’adaptateur de ciblage de mélange d’amorces, un colorant SYBR Green, un colorant de référence passive et un colorant bleu pour suivre les étapes de pipetage. Cette formulation unique facilite l’utilisation à chaque étape du flux de travail :
• Pas de préparation de réactifs
• Suivi des étapes de pipetage
• Un protocole de cyclage pour les bibliothèques de longueurs diverses et de niveaux de contenu GC/AT
• Concentration de colorant de référence passive universelle : un Master Mix pour tous les instruments qPCR

Le kit de quantification de la bibliothèque Collibri comprend également un tampon de dilution de bibliothèque prêt à l’emploi qui contient des agents stabilisants pour permettre l’intégrité de la bibliothèque après dilution. Le tampon contient du colorant jaune pour suivre les étapes de pipetage. Lorsqu’il est combiné, le Master Mix bleu et les bibliothèques diluées jaunes deviennent une solution verte. Cette fonctionnalité facilite le suivi de l’ajout des bibliothèques diluées ou des étalons d’ADN au Master Mix dans les puits de plaques qPCR, ce qui permet de réduire les erreurs de pipetage.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
Méthode de détectionSYBR
À utiliser avec (application)Quantification de bibliothèque Illumina NGS
À utiliser avec (équipement)7 500 Fast System, 7 900 HT Fast System, QuantStudio™, ViiA™ 7 System, StepOne™ System, StepOnePlus™ System
Performances de PCR riches en GCFaible
Nbre de réactions100 réactions
Méthode PCRqPCR
PolyméraseADN polymérase Hot-Start Platinum™ II Taq
Gamme de produitsCollibri
Type de produitKit de quantification de bibliothèques
Quantité100 reactions
Type d’échantillonADN, ARN
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Heure du testÉtalon
FormatKit
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver à -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

My qPCR instrument requires ROX. Which ROX dye do you recommend using with the Collibri Library Quantification Kit?

The Collibri Library Quantification Kit contains the Collibri Library Quantification Master Mix that already contains a universal concentration of ROX passive reference dye, so there is no need for additional adjustment with ROX dye regardless of the instrument you are working with.

Do I need to dilute the library prior to qPCR using the Collibri Library Quantification Kit?

Yes, the prepared library has to be diluted prior to running qPCR. Generally, it is recommended to run two dilution points, 1:10000 and 1:100000. For an established workflow where approximate library quantity is known, dilutions can be adjusted, but they need to fall within the range of the Collibri DNA Standards. Note that libraries should be diluted in the Collibri Library Dilution buffer that is included in the Collibri Library Quantification Kit. Dilution of the library stabilizes library molecules at low concentrations, producing accurate and reproducible results.

With the Collibri Library Quantification Kit, what effect do the visual cues for mixing have on library quantification results?

Colors in the Collibri Library Quantification Kit components have no effect on the universal passive reference dye, qPCR performance, or quantification results.

Can Collibri Library Quantification Kit be used with NGS libraries prepared for Ion Torrent sequencing?

No. However, the Collibri Library Quantification Kit contains the Collibri Library Quantification Master Mix that has premixed primers which are compatible with P5 and P7 adaptor sequences specific to the Illumina platform.

Citations et références (2)

Citations et références
Abstract
High-resolution microbiome analysis enabled by linking of 16S rRNA gene sequences with adjacent genomic contexts.
Authors:Kapustina Ž, Medžiune J, Alzbutas G, Rokaitis I, Matjošaitis K, Mackevicius G, Žeimyte S, Karpus L, Lubys A
Journal:Microb Genom
PubMed ID:34473015
Sequence-based characterization of bacterial communities has long been a hostage of limitations of both 16S rRNA gene and whole metagenome sequencing. Neither approach is universally applicable, and the main efforts to resolve constraints have been devoted to improvement of computational prediction tools. Here, we present semi-targeted 16S rRNA sequencing (st16S-seq), ... More
Predominance of the SARS-CoV-2 Lineage P.1 and Its Sublineage P.1.2 in Patients from the Metropolitan Region of Porto Alegre, Southern Brazil in March 2021.
Authors:Franceschi VB, Caldana GD, Perin C, Horn A, Peter C, Cybis GB, Ferrareze PAG, Rotta LN, Cadegiani FA, Zimerman RA, Thompson CE
Journal:Pathogens
PubMed ID:34451453
Almost a year after the COVID-19 pandemic had begun, new lineages (B.1.1.7, B.1.351, P.1, and B.1.617.2) associated with enhanced transmissibility, immunity evasion, and mortality were identified in the United Kingdom, South Africa, and Brazil. The previous most prevalent lineages in the state of Rio Grande do Sul (RS, Southern Brazil), ... More