Pro-Detect™ Rapid Antibody Isotyping Assay Kit, mouse

Le kit de dosage d’isotypage rapide d’anticorps Thermo Scientific Pro-Detect - Souris est un kit de débit latéral à jauge d’huile à usage unique pour une détermination rapide et facile de l’identité de classe et de sous-classe d’anticorps monoclonal de souris. Le dosage d’isotypage rapide d’anticorps utilise des bandelettes à base de membrane revêtue d’anticorps conjugués liés au colorant, qui fournissent un affichage visuel et coloré de l’isotype d’anticorps monoclonal en dix minutes. Le kit détermine les IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, IgM de souris, ainsi que l’identité de la chaîne légère (chaînes légères kappa et lambda).

Caractéristiques du kit de dosage d’isotypage rapide d’anticorps Pro-Detect :
• Longue durée de conservation — stable pendant au moins un an à 4°C
• Flux de travail simple — l’échantillon d’anticorps se dilue à l’aide du diluant fourni et en le plongeant dans la bande de flux latéra
• Rapide — en 5 – à 10 minutes une bande apparaît qui indique l’isotype d’anticorps
• Sensible — détecte les anticorps dans les milieux de culture tissulaire ou les échantillons de liquide ascite à des concentrations aussi faibles que ng/ml
• Specifique — le dosage ne réagit pas de manière croisée avec le sérum de veau fœtal (FBS)
• Fiable — les résultats sont similaires aux dosages d’isotypage d’anticorps standard basés sur ELISA

Chaque dosage d’isotypage d’anticorps rapide Pro-Detect s’effectue par un simple ajout d’un surnageant de culture tissulaire correctement dilué, d’un lysat, ou d’un échantillon d’ascites de souris dans un puits de tube à essai ou de microplaque et plongeant dans une bandelette de débit latérale. Les conjugués dorés intégrés dans la membrane de bandelette constituent des complexes spécifiques solubles de classe et de sous-classe avec les anticorps de l’échantillon. Ces complexes se déplacent le long de la membrane et sont séparés sur les régions de la membrane imprégnée d’anticorps spécifique de la classe et d’isotype de l’anticorps. Les résultats s’affichent sous la forme d’une bande rouge au-dessus de la description de la classe ou de la sous-classe imprimée, indiquant la présence de l’isotype d’anticorps.

La détermination de la classe et de la sous-classe d’un anticorps monoclonal est utile pour planifier la meilleure méthode de purification d’immunoglobuline. Ainsi, les immunoglobulines de souris IgA et IgM sont mieux purifiées par taille (exclusion en gel) ou à l’aide de colonnes de séparation par immuno-affinité. Les immunoglobulines de souris IgG2a et IgG2b sont purifiées avec de la protéine A immobilisée à un pH 7–8, tandis que l’IgG1 de souris se lie mieux à la protéine A à un pH 8–9. L’immunoglobuline qui contient des chaînes légères kappa peut être purifiée à l’aide de la protéine L immobilisée.

Le kit d’analyse d’isotypage d’anticorps rapide Pro-Detect est compatible avec le surnageant de culture tissulaire et le liquide d’ascite de souris ; il est plus sensible que les dosages conventionnels avec bâtonnet à base de billes en latex et beaucoup plus rapide que les dosages d’isotypage basés sur ELISA. Le kit ne nécessite que 0,5 µl de liquide ascite, 2 – 22 µl de surnageant de culture cellulaire ou 1,5 ng d’anticorps purifié.