Kit système d’expression inductible Expi293™
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Kit système d’expression inductible Expi293™

Le kit de système d’expression inductible EXPI293 fait partie de la plateforme Expi293 pour l’expression rapide et à haut rendementAfficher plus
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RéférenceQuantité
A392511 kit
Référence A39251
Prix (EUR)
3 310,00
Each
Quantité:
1 kit
Prix (EUR)
3 310,00
Each
Le kit de système d’expression inductible EXPI293 fait partie de la plateforme Expi293 pour l’expression rapide et à haut rendement de protéines transitoires à partir de cellules 293 de mammifères. Le kit de système est centré sur des cellules Expi293F conçues qui expriment de façon stable la protéine de répression de la tétracycline (TetR), permettant ainsi l’expression génétique de la tétracycline par la protéine régulatrice. La lignée cellulaire inductible Expi293F a été établie par l’intégration stable du plasmide pcDNA6 / TR réglementaire, qui code le gène TetR sous le contrôle du promoteur humain CMV. Cette lignée cellulaire est un outil puissant pour une expression à haut rendement inductible de la tétracycline des protéines recombinantes.

Les caractéristiques du kit de système d’expression inductible EXPI293 sont les suivantes :
• Expression protéique inductible par la tétracycline avec des niveaux d’expression basale extrêmement faibles
• Rendements protéiques équivalents aux cellules parentales Expi293F jusqu’à 1 g / l
• Vecteur d’expression de l’ADNc5 / TO pour l’expression régulée par la tétracycline du gène d’intérêt
• Suspension, culture à haute densité des cellules inductibles Expi293F dans le milieu d’expression Expi293
• Transfection transitoire à haute efficacité utilisant le réactif ExpiFectamine 293 en combinaison avec des séquences activatrices de transfection spécialisées

Les composants inclus dans le kit de système d’expression inductible EXPI293 sont : un flacon de cellules inductibles Expi293F congelées, 1 l de milieu d’expression Expi293, un kit de transfection ExpiFectamine 293 suffisant pour transfecter 1 l de culture, 100 ml de tampon de complexation Opti-Plex, un kit de vecteur d’expression de mammifère pcDNA5 / TO, 500 mg de chlorhydrate de tétracycline et le vecteur de contrôle positif pRABBIT IgG IRES-EmGFP. Tous les composants du système d’expression inductible Expi293 sont également disponibles indépendamment à l’achat.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Lignée cellulaireExpi293F™
Type de livraisonTransfection
À utiliser avec (application)Expression de protéines
Gamme de produitsExpi293
Quantité1 kit
Conditions d’expéditionapprouvée pour l’expédition à température ambiante ou sur de la glace mouillée ou sèche
Matériau de départADN
AccélérateurCMV/TO
TypeKit de système d’expression inductible
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• Cellules inductibles Expi293F (1 x 107 cellules / flacon), conserver dans de l’azote liquide en phase vapeur
• 1 L de milieu d’expression Expi293, conserver entre 2 et 8°C (à l’abri de la lumière)
• Kit de transfection ExpiFectamine 293 pour 1 L de culture, conserver entre 2 et 8°C
• 100 ml de tampon de complexation Opti-Plex, conserver entre 2 et 8°C (à l’abri de la lumière)
• 20 µg de vecteur d’expression de mammifère pcDNA5 / TO, conserver entre 2 et 8°C ou stockage à long terme à -20°C.
• Vecteur de contrôle positif pRABBIT IgG IRES-EmGFP, conserver entre 2 et 8°C ou stockage à long terme à -20°C.
• 500 mg de chlorhydrate de tétracycline, conserver à -20°C

Foire aux questions (FAQ)

Can I leave my Expi293F culture expressing for more than 7 days?

The growth and expression characteristics of Expi293F cells are such that, by 7 days post-transfection, the culture medium should be close to being spent and maximal protein expression should have already been achieved. Continued incubation will result in a large decrease in cell culture viability.

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What is the difference between the Expi293F Inducible Cell Line and the T-REx -293 Cell Line?

The Expi293F Inducible Cell Line was created using the same technology as the T-REx -293 Cell Line. Both cell lines have been created by stable transfection with the pcDNA 6/TR vector; thus, they ubiquitously express the tetracycline repressor (TetR) protein. The parental cell line of Expi293F Inducible cells is Expi293F Cells (Cat. No. A14527). The key differences between these 2 cell lines are:
- Expi293F Inducible cells are grown in suspension and are adapted to high-density culture (> 15x10E6 cells/mL).
- Expi293F Inducible cells grow in Expi293 Expression System and perform equivalently to parental Expi293F cells, thus making them ideal for high-yield, inducible protein expression.

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What method do you recommend for quantifying rabbit IgG expression from pRABBIT IgG IRES-EmGFP Positive Control Vector, Cat. No. A39243?

The formation of intact IgG molecules may be quantified using a sandwich ELISA designed to capture and detect rabbit IgG. Besides the rabbit IgG positive control vector, reagents, and consumables that are included in the kit, you will also need purified rabbit IgG to be used as a standard, F(ab')2-Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, HRP (Cat. No. A10547), Protein A Coated Plates, Clear, 96-Well (Cat. No. 15130), TMB Substrate Kit (Cat. No. 34021), SuperBlock (TBS) Blocking Buffer (Cat. No. 37535), and PBS or TBS buffer for washes. There is an example procedure in our Protein A Coated Plates manual (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/MAN0011310_Thermo Scientific_ProteinA_G_AG_Coat_96Well_UG.pdf). Please note that our R&D scientists determine titer values from crude cell culture supernatants using a Pall Life Sciences FortéBio Octet instrument equipped with a Protein A biosensor.

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Do you offer a GFP-expressing mammalian expression vector that I can use as a control to monitor my transfection and expression with the Expi systems?

We offer pRABBIT IgG IRES-EmGFP Positive Control Vector, Cat. No. A39243, which you can use to monitor your transfection and expression.

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Can I use doxycycline instead of tetracycline as an inducer in the Expi293 Inducible Expression System?

Doxycycline may be used as an alternative inducing agent in the Expi293 Inducible System. It is similar to tetracycline in its mechanism of action. Doxycycline has been shown to have a longer half-life than tetracycline (48 hr vs. 24 hr, respectively). If the use of doxycycline is desired with the Expi293 Inducible System, we recommend performing a dose-response curve to determine the optimal concentration for induction.

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