Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format
Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format
Thermo Scientific™

Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format

Le réactif de transfert de marquage à la biotine sulfo-SBED Thermo Scientific Pierce est un réactif multifonctionnel pour marquer uneAfficher plus
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RéférenceQuantité
A3926010 x 1 mg
3303310 mg
Référence A39260
Prix (EUR)
493,00
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Quantité:
10 x 1 mg
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Le réactif de transfert de marquage à la biotine sulfo-SBED Thermo Scientific Pierce est un réactif multifonctionnel pour marquer une protéine purifiée, puis transférer de manière covalente le tag biotine attaché sur des partenaires d’interaction spécifiques à cette protéine.

Sulfo-SBED est l’abréviation de sulfo-N-hydroxysuccinimidyl-2-(6-[biotinamido]-2-(p-azido benzamido)-hexanoamido) éthyl-1,3'-dithioproprionate. Il s’agit d’un agent de réticulation chimique hétérobifonctionnel capable de se lier de manière covalente aux amines primaires à une extrémité et à presque tous les groupes fonctionnels présents dans les protéines à l’autre extrémité. Contrairement aux agents de réticulation classiques, le sulfo-SBED comprend également un groupe biotine et un bras espaceur disulfure clivable. Ensemble, ces caractéristiques permettent une réticulation séquentielle des protéines en interaction et le transfert du tag d’affinité biotine d’une protéine (c.-à-d. une protéine “appât” purifiée) sur une autre protéine (peut-être une protéine “proie” inconnue). Le transfert de marquage est une méthode in vitro puissante pour la découverte d’interactions entre protéines. Un nombre croissant de publications comprennent l’utilisation du réactif de transfert de marquage à la biotine sulfo-SBED pour identifier des interactions avec des partenaires de liaison protéique inconnus jusqu’ici et pour mieux caractériser les domaines de liaison protéique spécifiques dans d’autres interactions entre protéines.

Protocole type pour une expérience de transfert de marquage :

• Ajoutez quelques microlitres de réactif sulfo-SBED dissous avec 0,5 à 1 ml de protéine appât purifiée dans du PBS.
• Incuber le mélange dans l’obscurité, sur la glace ou à température ambiante, pendant 30 à 120 minutes.
• Dessalez ou dialysez (avec un éclairage tamisé) pour séparer le surplus de sulfo-SBED n’ayant pas réagi de la protéine “appât” marquée.
• Ajoutez la protéine appât marquée au lysat cellulaire ou à toute autre solution contenant de potentielles protéines cibles de liaison (“proie”).
• Lorsque des complexes d’interaction se sont formés, exposez la solution à une lumière ultraviolette (365 nm) pendant plusieurs minutes.
• Analysez les produits à l’aide de l’une des méthodes suivantes :
• Transfert Western : Clivez les produits de réticulation dans du DTT, séparez les protéines par SDS-PAGE, et détectez les bandes biotinylées par transfert Western à l’aide de la streptavidine-HRP.
• Purification suivie d’une analyse par spectrométrie de masse ou un séquençage : Purifiez par affinité les protéines biotinylées ou les fragments de peptides après digestion par la trypsine et effectuez la MS ou le séquençage pour caractériser les protéines impliquées.

Produits associés
Trousse de transfert de marquage de biotine Sulfo-SBED - Application de transfert Western

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
Réactivité chimiqueAmine-à-Amine
Méthode d’étiquetageMarquage chimique, transfert de marquage
Marqueur ou colorantBiotine
Type de produitRéactif de transfert de marquage de biotine Sulfo-SBED
Quantité10 x 1 mg
Groupement de réactifsEster NHS, alcyne
Conditions d’expéditionQualifié pour la glace ambiante ou humide.
SolubilitéDMF (diméthylformamide), DMSO (diméthylsulfoxyde), méthanol, eau
Type d’étiquetteBiotine et autres haptènes
Gamme de produitsPierce
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Stockage à 4°C.

Foire aux questions (FAQ)

Can you provide the shelf-life for Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent?

Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent is covered under our general 1-year warranty and is guaranteed to be fully functional for 12 months from the date of shipment, if stored as recommended. Please see section 8.1 of our Terms & Conditions of Sale (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/Terms-and-Conditions-of-Sale.pdf) for more details.

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How does a product with "No-Weigh" format reduce my concern over reagent stability?

The No-Weigh product format, where small amounts of reagent are pre-weighed and packaged separately, prevents the contamination and loss of reagent reactivity over time associated with repetitive opening and closing of a single vial. This format enables use of a fresh vial of reagent each time and eliminates the hassle of weighing out small amounts of reagent. Please view additional information and the video at: https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-labeling-crosslinking/no-weigh-packaging.html

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What crosslinkers do you recommend to study protein-protein interactions that are mass spectrometry - compatible?

We offer Sufo-SBED (Cat. Nos. 33033 and A39260).

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What are the options for crosslinking proteins to nucleic acids, and what are the differences between them?

We offer the following crosslinkers for protein to nucleic acids: formaldehyde (Cat. No. 28906), SPB (Cat. No. 23013), SDAD (Cat. No. 26169), sulfo-SDAD (Cat. No. 26175), and sulfo-SBED (Cat. No. A39260).
Formaldehyde can be used for DNA-DNA crosslinking as well as DNA-protein crosslinking. While it is good for crosslinking proteins that are in direct contact with DNA, formaldehyde cannot link proteins that may be bound in a complex with other proteins but are not in direct contact with DNA. EGS or DSG can crosslink proteins to other proteins that are in direct contact with DNA and crosslinked to DNA by formaldehyde.
SPB, Sulfo-SDAD, and Sulfo-SBED are all photoreactive crosslinkers. SPB is an NHS-ester and psoralen heterobifunctional crosslinker that conjugates primary amines on proteins to DNA via photo-activated intercalation of psoralen to pyrimidine bases. The psoralen tricyclic planar ring system intercalates into double-stranded, and to a lesser extent, single-stranded DNA and RNA. The photoreactive psoralen group provides more selective covalent binding to nucleic acids than either phenyl azide or diazerine linkers, which makes SPB the best choice. The diazerine on sulfo-SDAD and the phenyl azide on sulfo-SBED are not selective for nucleic acids and can crosslink other biomolecules in the same besides any protein-DNA interactions. Sulfo-SBED involves biotin transfer rather than actual linking.

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