L’ADN polymérase Thermo Scientific EquiPhi29 est un mutant exclusif d’ADN polymérase phi29 développé par l’évolution des protéines in vitro. Cette enzyme est significativement améliorée par rapport à l’ADN polymérase phi29 en termes de thermostabilité des protéines, vitesse de réaction, rendement du produit et de biais d’amplification, tout en conservant tous les avantages de l’enzyme de type sauvage, y compris la haute processivité (plus de 70 kb), la forte activité de transfert de brin, l’activité exonucléase 3’→5’ (corrective) agissant de préférence sur l’ADN ou l’ARN simple brin. C’est pourquoi les amorces aléatoires résistantes à l’exonucléase sont recommandées.

Les points clés comprennent :
• Biais d’amplification le plus faible offert sur le marché
• Rendements extrêmement élevés d’ADN amplifié même à partir de quantités infimes de gabarits
• Synthèse très précise de l’ADN dans un temps plus court

Applications :
• Amplification non biaisée du génome entier (WGA) à l’aide divers types d’échantillons :
   –ADN provenant d’une cellule unique
   –Cellules microbiennes non cultivées et particules virales
   –Organismes pathogènes ou métagénomes
   –ADN pour la détection SNP et STR
• Amplification par cercle roulant (RCA)
• Amplification d’ADN amorcé par une protéine
• Clonage sans cellules d’ADN létal
• Génotypage in situ à l’aide de sondes cadenas
• Amplification d’ADN amorcé par ARN

Remarque : l’ajout de pyrophosphatase au mélange réactionnel avec l’ADN polymérase EquiPhi29 peut améliorer encore la synthèse de l’ADN.