Dosage de cellules T CD8+ PureQuant™

Les dosages Applied Biosystems PureQuant sont une famille de dosages qui identifient et quantifient avec précision des types de cellules immunitaires spécifiques dans une population mixte de cellules. Ces dosages sont basés sur la qPCR TaqMan et mesurent la méthylation génomique de l’ADN à des sites spécifiques qui servent d’identificateur unique. Les dosages comprennent des étalons et des contrôles et chaque plaque 96 puits peut accueillir jusqu’à sept échantillons de test. Les résultats sont fournis en pourcentage du type de cellule cible par rapport aux cellules d’entrée totales à l’aide d’un outil d’analyse libre.

Le dosage de cellules T PureQuant CD8+ utilise le gène CD8B comme marqueur épigénétique pour les cellules T CD8+ ; le dosage cible les éléments régulateurs dans son troisième intron (voir http://stm.sciencemag.org/content/10/452/eaan3508).

Parmi les nombreux avantages :
• Performance éprouvée : la technologie de base a été utilisée pour l’identification et la quantification des types de cellules immunitaires pendant plus d’une décennie
• Facilement normalisé : la méthode de qPCR permet des résultats cohérents entre plusieurs utilisateurs, instruments et sites
• Facilite les démarches réglementaires : spécifications de performance établies selon les directives de l’ICHQ2(R1)
• Flexibilité de la planification : le dosage peut être effectué à l’aide de cellules / ADNg frais ou congelés

Les dosages comprennent tous les réactifs, étalons et contrôles requis pour exécuter le dosage. Composants spécifiques :
• Calibrateur : corrige la variation de l’efficacité de conversion des bisulfites. Le calibrateur à base de plasmides abrite les régions cibles génomiques dans des rapports équimolaires et inclut la GAPDH. Soumis à une conversion de bisulfite suivie d’une estimation du nombre de copies via la courbe standard de qPCR. Permet d’estimer le facteur d’efficacité du bisulfite spécifique au dosage : le rapport entre les nombres de copies TpG / GAPDH mesurés à partir du même plasmide.
• Référence : vérifie les performances des tests. Se compose d’ADN génomique extrait du sang humain de donneurs sains mis en commun. Les valeurs de référence représentent la plage prévue du type de cellule cible. Par exemple, les cellules CD8+ sont généralement plus abondantes que les cellules Treg ou Th17.
• Étalons : déterminez le numéro de copie inconnu. Se compose de six dilutions couvrant une plage dynamique linéaire à 4 logs (30 à 31 250 copies). Les nombres de copies absolues peuvent être déterminés de manière fiable à l’aide de la pente et de l’intersection des courbes standard respectives.

Ce produit est fabriqué sur site avec un système de gestion de la qualité certifié ISO 9001.