Platinum™ Direct PCR Universal Master Mix
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Invitrogen™

Platinum™ Direct PCR Universal Master Mix

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Le mélange Invitrogen Platinum Direct PCR Universal Master Mix est conçu pour amplifier l’ADN directement à partir de divers échantillons sans avoir à purifier l’ADN. Il contient de l’ADN polymérase Platinum II Taq à démarrage à chaud avec des dNTP dans un tampon innovant qui permet une hybridation d’amorce universelle pour des performances supérieures dans les applications de PCR directe.

Caractéristiques du mélange Platinum Direct PCR Universal Master Mix :
• Amplification directe de l’ADN à partir de divers échantillons grâce à l’ADN polymérase Platinum II Taq à démarrage à chaud, modifiée et tolérante aux inhibiteurs
• Température d’hybridation d’amorce universelle grâce à un tampon innovant qui permet une hybridation d’amorce à 60°C
• Spécificité, sensibilité et rendements supérieurs grâce à la technologie de démarrage à chaud Platinum

Le mélange Platinum Direct PCR Universal Master Mix est conçu pour fonctionner avec une variété d’échantillons d’origines différentes telles que les échantillons d’animaux, d’humains, de plantes, d’insectes, de vers et de bactéries. Le kit comprend des réactifs optimisés pour obtenir des résultats supérieurs. Le protocole de lyse rapide permet une amplification efficace à partir de modèles jusqu’à 8 kb de taille et un cocycle de fragments de longueur différente. Les échantillons dans le tampon de lyse peuvent être conservés pour une utilisation ultérieure. Le mélange Platinum Direct PCR Universal Master Mix est fourni avec la séquence activatrice GC Platinum en option pour une amplification spécifique et des rendements améliorés de cibles riches en GC.

L’ADN polymérase Platinum II Taq conçue confère un cycle et une tolérance plus rapides aux inhibiteurs de réaction provenant de matériaux d’échantillonnage. Les anticorps exclusifs Platinum Taq bloquent l’activité de la polymérase à des températures ambiantes et se dissocient après l’étape de dénaturation initiale. Ce démarrage à chaud automatique offre une sensibilité, une spécificité et un rendement accrus, tout en permettant l’assemblage de la réaction à température ambiante.

En raison de la composition unique du mélange Platinum Direct PCR Universal Master Mix, la température d’hybridation de 60°C peut être utilisée pour la plupart des paires d’amorces en suivant les règles générales de conception. L’isostabilisation des molécules dans le tampon augmente la stabilité du duplex amorce-modèle pendant l’étape d’hybridation et améliore la spécificité sans qu’il soit nécessaire d’optimiser la température d’hybridation pour chaque paire d’amorces. Différents dosages PCR peuvent être effectués dans le même cycle en utilisant le même protocole avec une température d’hybridation d’amorce universelle et l’étape d’extension sélectionnée pour le fragment le plus long à amplifier.

Pour en savoir plus sur le mélange Platinum Direct PCR Universal Master Mix ›
Spécifications
Fidélité (par rapport à Taq)1 X
Concept écologiqueMoins dangereux, moins de déchets
Hot StartFonctionnalité Hot-Start (démarrage à chaud) intégrée
Nbre de réactions100 réactions
En surplomb3’-A
PolyméraseADN polymérase Platinum II Taq à démarrage à chaud
Type de produitMaster Mix universel de PCR directe
Quantité100 réactions
Format de réactionSuperMix ou Master Mix
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Taille (produit final)8 kb
Concentration2X
À utiliser avec (application)Hot-start PCR, Real Time PCR (qPCR)
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réactionRapide
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• 1 ml de Master Mix universel de PCR directe 2X Platinum
• 5 ml de tampon de lyse
• 150 µl de protéinase K
• 1,25 ml d’activateur Platinum GC
• 1,25 ml d’eau, sans nucléase

Foire aux questions (FAQ)

Can I use plant or tissue sample that is not on the list of the Platinum Direct PCR Universal Master Mix tested samples?

You can use any plant or tissue sample. However, when working with new sample materials, we recommend using the Lysis protocol as it allows several PCR reactions to be performed from the same sample during optimization. We also recommend having a positive control with purified sample DNA to ensure that the PCR conditions are optimal. If the positive control with purified DNA fails, the PCR conditions should be optimized before continuing further.

When performing Direct PCR with the Platinum Direct PCR Universal Master Mix, do I need to use Proteinase K?

Proteinase K is required when PCR is performed directly from tissue samples using the Direct PCR protocol. Cell debris present in these PCR products can cause DNA fragments to get trapped in the agarose gel wells and Proteinase K helps to eliminate this.

Is the PCR product from reactions performed with Platinum Direct PCR Universal Master Mix compatible with E-Gel agarose gels?

Electrophoretic separation on E-Gel agarose gels depends on the salt concentration in the analyzed sample. For optimal band separation, we recommend diluting PCR reactions 2- to 20-fold with water, prior to running on E-Gel agarose gels. The dyes in the Platinum Direct PCR Universal Master Mix do not interfere with fragment separation on E-Gel agarose gels.

With the Platinum Direct PCR Universal Master Mix, can I leave the samples in the Lysis Solution (Lysis Buffer containing Proteinase K) for longer than 1 min?

Samples can be incubated for up to 8 hr at room temperature in the Lysis Solution, prior to the 98 degrees C Proteinase K inactivation step. Please note that longer incubation may increase the product yield. For longer incubation, the Proteinase K inactivation step may be increased up to 10 min.

What is the biggest sample size that I can use with Platinum Direct PCR Universal Master Mix?

For the Direct protocol, the recommended sample size is up to 1 mm. For the Lysis protocol, the recommended sample size is up to 2 mm. Sample size can be increased up to 1 cm, however, Lysis Buffer volume needs to be increased to cover the whole sample.