Kits de préparation d’échantillons EasyPep™ MS
Thermo Scientific™

Kits de préparation d’échantillons EasyPep™ MS

Générez des échantillons protéomiques de haute qualité pour l’analyse MS en moins de quatre heures à l’aide de kits de préparation d’échantillon EasyPep MS optimisés.
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RéférenceDescription
A45734Kit de préparation d’échantillons Maxi
A40006Kit de préparation d’échantillons Mini MS
A57864Kit de préparation d’échantillons Micro MS
A45733Kit de préparation d’échantillons MS
A45735Tampon de lyse
A57865Plaque de nettoyage des peptides
Référence A45734
Prix (EUR)
1 680,65
Online Exclusive
1 910,00
Économisez 229,35 (12%)
Each
Description:
Kit de préparation d’échantillons Maxi
Prix (EUR)
1 680,65
Online Exclusive
1 910,00
Économisez 229,35 (12%)
Each

Les kits de préparation d’échantillons EasyPep Mini MS permettent un traitement efficace et reproductible des cellules et tissus de mammifères en culture pour l’analyse MS protéomique. Le kit contient des tampons préformulés, un mélange enzymatique de qualité MS, des colonnes de nettoyage de peptides et un protocole optimisé pour générer des échantillons de peptides compatibles MS en moins de trois heures. Les kits sont optimisés pour traiter des échantillons de protéines de 10 à 100 μg avec un rendement élevé de peptides prêts pour l’analyse MS.

Complet : comprend des réactifs préformulés pour la lyse par digestion, des colonnes de nettoyage de peptides et un protocole optimisé pour 20 échantillons maximum
Optimisé : protocole et réactifs simplifiés qui minimisent le nombre d’étapes et le temps nécessaires pour traiter les échantillons
Flexible : les réactifs et le protocole ont été vérifiés à l’aide de cellules, de plasma et d’échantillons de tissus pour 10 à 100 µg d’échantillons
Gain de temps : réduction du temps de traitement des échantillons de plus d’un jour à moins de trois heures
Compatible : la préparation finale est prête pour l’analyse MS directe et d’autres applications en aval, y compris le marquage TMT

La préparation d’échantillons de peptides pour l’analyse MS est complexe, avec de nombreuses étapes et différents protocoles, ce qui engendre une variabilité des échantillons en termes de qualité et de quantité. Ce kit a été conçu pour améliorer la reproductibilité tout en économisant du temps de manipulation et de traitement. Le nombre d’étapes et le temps de traitement ont été réduits grâce à l’ajout de la nucléase universelle pour réduire la viscosité à partir des acides nucléiques (remplacement de la sonication), une solution rapide, dans un seul récipient, de réduction/alkylation pour la modification de la cystéine (carbamidométhylation, + 57,02) et à un mélange de protéase trypsine/Lys-C pour une digestion plus complète. En outre, le kit comprend des colonnes et des tampons de nettoyage Peptide pour préparer des échantillons de peptides sans détergent pour l’analyse MS. Les réactifs et le protocole optimisés produisent des peptides de haute qualité qui sont compatibles avec le marquage TMT et d’autres applications en aval, ou sont prêts pour l’analyse MS.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
DescriptionKit de préparation d’échantillons Maxi
Type de produit finalpeptides
À utiliser avec (équipement)Spectromètre de masse
Marqueur ou colorantNon marqué
Quantité8 réactions
Conditions d’expéditionGlace
Étape du flux de travailDigestion des protéines
Méthode de détectionSpectrométrie de masse
Gamme de produitsEasyPep
Type de produitKit de préparation des échantillons
Matériau de départÉchantillons de protéines
Unit SizeEach
Contenu et stockage
  • Solution de lyse, 25 ml, stocker à 4°C.
  • Nucléase universelle, 25 kU, stocker à -20°°C.
  • Solution de réduction, 7 ml, stocker à 4°C.
  • Solution d’alkylation, 7 ml, stocker à 4°C.
  • Solution de reconstitution enzymatique, 7 ml, stocker à 4°C.
  • Mélange de protéases Trypsine/Lys-C Pierce™, qualité MS, 8 x 100 µg, stocker à -20°°C.
  • Solution d’arrêt de digestion, 7 ml, stocker à 4°C.
  • Colonnes de nettoyage de peptides, 8 chacun, stocker à 4°C
  • Solution de lavage A, 40 ml, conserver à 4°°C.
  • Solution de lavage B, 3 x 27 ml, stocker à 4°°C.
  • Solution d’élution, 2 x 20 ml, stocker à 4°C.
  • Tubes de prélèvement à faible liaison protéique, 2 ml, 40 chacun, stocker à 4°C.

Foire aux questions (FAQ)

Are the EasyPep MS Sample Prep Kits compatible with vacuum pumps/dry-down devices?

As per protocol, peptide samples need to be dried down prior to LC-MS analysis. This step can be performed using vacuum pumps/dry-down devices without any harm caused to the device by the components present in the elution buffer within the EasyPep MS Sample Prep Kits.

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After cell lysis, my mass spectrometry sample is very viscous and difficult to pipette. How do I reduce the sample viscosity?

High sample viscosity after lysis is due to release of DNA from the nucleus. Sonication or addition of a nuclease such as the Pierce Universal Nuclease (Cat. No. 88700, 88701, or 88702) can be used to degrade DNA and reduce sample viscosity.

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How do I process yeast samples with EasyPep Mini MS Sample prep Kit?

Add 0.5 mm diameter glass beads to the sample pelleted in Easy Pep Lysis Solution and proceed as recommended in the Easy Pep sample prep protocol. Vortex vigorously for few minutes, spin at 16,000 x g for 5 mins, and extract the supernatant for protein assay and further downstream sample preparation.

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How do I process bacterial samples with EasyPep MS Sample Prep kits?

Add 1-2 µL of 50 mg/mL Lysozyme Solution (Cat. No. 90082) to 200 µL of the EasyPep lysis buffer provided in the kit and proceed with the sample prep. Add 200 µL of the prepared lysis solution to 5 X 10E8 bacterial cells (E. coli cells) (OD600 equal to 1, corresponding to 1 X 10E8 CFUs). Lyse by pipetting the sample repeatedly and centrifuge at 16,000 x g for 5 mins. Alternatively, E. coli cells can be lysed in lysis buffer using bead beating or sonication instead of lysozyme. After lysis, dilute samples to 1 mg/mL using lysis buffer, proceed with the EasyPep protocol for reduction, alkylation, digestion, and clean up as described in the product manual.

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Do you offer a mass spec sample prep method for low abundant proteins in samples?

High Select Top14 Abundant Protein Depletion Mini Spin columns (Cat. Nos. A36369, A36370) can be used to deplete top 14 abundant plasma/serum proteins. The depletion of highly abundant proteins from the sample enables the detection and identification of low abundant proteins. The depleted samples can be processed with EasyPep MS sample prep kit to generate digested plasma/serum samples. The clean digested samples can be processed by nanoLC-MS/MS analysis for discovery experiments or nanoLC-PRM/MS analysis for targeted experiments.

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