Master Mix HiFi d’assemblage GeneArt™ Gibson
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Master Mix HiFi d’assemblage GeneArt™ Gibson

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Le Master Mix HiFi d’assemblage GeneArt Gibson permet l’assemblage d’ADN Clonage via une technique qui permet de lier de multiples fragments d’ADN en toute transparence dans une réaction isotherme en une étape de 15 à 60 minutes. Les fragments d’ADN de différentes longueurs sont assemblés uniformément à l’aide de chevauchements complémentaires entre les fragments. Grâce à sa flexibilité inhérente, cette approche convient aux constructions d’ADN de petite et grande taille et comprend des inserts simples et multiples. Les produits résultants peuvent être utilisés pour un certain nombre d’applications en aval, notamment la transformation, la PCR et l’amplification en cercle roulant (RCA). Le kit de Master Mix HiFi d’assemblage GeneArt Gibson comprend un Master Mix, un contrôle positif et de l’eau, et peut accueillir l’utilisation de vos propres cellules compétentes.

Caractéristiques du Master Mix HiFi d’assemblage GeneArt Gibson :
Simple : assemblez et clonez jusqu’à six fragments d’ADN en une seule réaction
Efficace : la haute fidélité offre des clones plus corrects que les autres méthodes
Flexible : les consignes permettent un assemblage dans n’importe quel vecteur de votre choix
Pratique : disponible sous forme de kits de Master Mix et de kits de clonage complets avec des cellules chimiques ou électrocompétentes
Fiable : plus de 4 000 citations dans la littérature scientifique soulignant sa grande efficacité

Assemblage de plusieurs fragments
Le clonage HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson est un processus simple en une seule étape qui permet de combiner jusqu’à six fragments dans un mélange enzymatique exclusif afin d’assembler des fragments d’ADN avec une homologie des extrémités terminales partagée sans séquences supplémentaires ou cicatrices (transparent). Après une incubation de 15 à 60 minutes, une portion de la réaction d’assemblage est ensuite transformée en cellules chimiquement compétentes ou électrocompétentes, afin d’obtenir des clones prêts à être analysés le jour suivant. L’homologie des extrémités terminales de 20 à 40 paires de base requise est conçue dans le fragment de novo pour la synthèse ou peut être facilement conçue par amplification PCR avec des oligos d’ADN personnalisés. Ce mélange enzymatique spécial crée une construction d’ADN homogène et liée par covalence, qui offre une grande efficacité.

Une méthode robuste pour une efficacité maximale
En raison du produit final lié par covalence, la méthode HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson permet l’utilisation de cellules chimiquement compétentes ou de cellules électrocompétentes pour une efficacité de transformation optimale, ce qui permet de trouver plus efficacement le clone adéquat, en particulier pour les constructions plus difficiles. Il n’est pas nécessaire d’utiliser des enzymes de restriction, une ligature ou des sites de recombinaison, et la méthode garantit une construction parfaitement transparente sans bases supplémentaires indésirables.

Grande polyvalence
La méthode HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson garantit la polyvalence, permet de simplifier de nombreuses techniques grâce à la combinaison, l’ajout, la suppression ou l’échange rapide de segments d’ADN et élimine la nécessité de sous-cloner, ce qui permet de gagner du temps et des efforts dans le flux de travail lié au clonage.

Des formats pratiques
Les kits HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson sont disponibles dans plusieurs formats, notamment :
Kit de clonage HiFi d’assemblage GeneArt Gibson, cellules chimiquement compétentes (avec cellules One Shot TOP10 chimiquement compétentes)
Kit de clonage HiFi d’assemblage GeneArt Gibson, cellules électrocompétentes (avec cellules électrocompétentes Electromax DH10B)
• Kits Master Mix HiFi d’assemblage GeneArt Gibson (kit de clonage sans cellules) (cette page)

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Méthode de clonageClonage transparent
Type de contrôleContrôle positif
À utiliser avec (application)Clonage et assemblage génétique transparents
Nbre de réactions50 réactions
Nombre de fragmentsJusqu’à 6 fragments
Gamme de produitsGENEART
Type de produitMaster Mix HiFi
Quantité50 réactions
Conditions d’expéditionAmbient, Wet Ice, Dry Ice
Étape du flux de travailAssemblage d’ADN
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Comprend un Master Mix, un contrôle positif et de l’eau, permet d’utiliser vos propres cellules compétentes.

Foire aux questions (FAQ)

How big do DNA fragment homology arms need to be when using Gibson Assembly kits?

For fragments that are 8 kb or lesser in length, an overlap of 20-40 bp is recommended. For fragments greater than 8 kb in length, an overlap of 40-100 bp is recommended.

What type of vector can I use with Gibson Assembly kits?

Any linearized vector can be used with Gibson Assembly kits. We recommend using high-copy vectors for small inserts (<10 kb) and low-copy vectors for large inserts or toxic genes.

What type of inserts can I use with Gibson Assembly kits?

Any linearized DNA fragment, including PCR products, restriction digestion products, and GeneArt Strings can be used with Gibson Assembly kits.

What is the difference between the Gibson Assembly HiFi and the Gibson Assembly EX kits?

Gibson Assembly HiFi kits provide the quickest and easiest way to assemble up to six fragments in a single-tube reaction. The more robust Gibson Assembly EX kits enable assembly of up to 15 fragments in a single-tube, two-step reaction.