Le kit MEGAscript™ T7 est un kit de transcription in vitro à rendement très élevé. Les rendements élevés sont réalisables en modifiant les conditions typiques de réaction de transcription afin que les concentrations très élevées de nucléotide puissent être utilisées efficacement. Le mélange enzymatique T7 et le tampon de réaction 10X sont étalonnés spécifiquement pour chaque lot et pour l’ARN polymérase.

Utilisation du kit MEGAscript™ T7
Le kit MEGAscript™ T7 contient des composants de la réaction de transcription in vitro ainsi qu’un modèle de contrôle. Son rendement atteint un total de 3 à 5 mg d’ARN (environ 100 µg d’ARN ou plus par réaction) à partir du modèle de contrôle fourni avec le kit. Ceci correspond à 400 à 650 mol d’ARN pour chaque mole de modèle. En règle générale, les modèles plus petits produisent une masse inférieure et un rendement molaire supérieur du produit. Les conditions inédites de la réaction de transcription et une technologie brevetée à haut rendement permettent de synthétiser 10 à 50 fois le montant d’ARN produit par les réactions classiques de transcription.

Applications
Le kit MEGAscript™ T7 est prévu pour synthétiser de grandes quantités d’ARN non marqué ou avec une faible activité spécifique pour toute une variété d’applications, y compris la traduction in vitro, les études d’antisens / de micro-injections et l’isolement des protéines de liaison à l’ARN. Dans les réactions de transcription à grande échelle, la concentration des 4 nucléotides est élevée, nettement supérieure au K_m pour l’enzyme. En règle générale, le kit MEGAscript™ T7 produit 10 fois plus d’ARN que les réactions de transcription in vitro classiques. Le kit n’est pas recommandé pour synthétiser des sondes à activité spécifique élevée.

Produits accessoires
Les kits d’amplification d’ARNa MessageAmp™ sont alimentés par la technologie MEGAscript™ et développés spécialement pour l’amplification d’ARNc avant l’analyse de réseau. Pour purifier les produits de la transcription in vitro des nucléotides libres, des composants de tampon et des enzymes, nous vous recommandons d’utiliser le kit MEGAclear™ (n° cat. AM1908) et le kit MEGAclear™-96 (n° cat. AM1909).