Ambion™ RNase H (ribonucléase H) est isolée à partir d’une souche d’E. coli qui surexprime le gène. La RNase H dégrade spécifiquement l’ARN chez les hybrides ARN:ADN pour produire des produits avec des extrémités de 3’-hydroxyle et de 5’-phosphate. Elle est fournie dans un tube contenant 1 000 U (10 U/µl). L’enzyme ne dégrade pas l’ADN ni l’ARN non hybridé. La RNase H fait partie intégrante de la plupart des protocoles NASBA et d’amplification d’ARN. Elle peut être utilisée pour dégrader des ARN spécifiques lorsque l’oligo de l’ADN complémentaire est hybridé, notamment lors de la suppression de la queue poly(A) de l’ARNm hybridé à l’oligo(dT). La ribonucléase H est soumise à un test rigoureux de détection de l’activité de protéase, de RNase, ainsi que des endonucléases et exonucléases non spécifiques contaminantes.
Définition de l’unité :
Une unité de ribonucléase H correspond à la quantité d’enzyme nécessaire pour augmenter la fluorescence de 1,5 RFU par seconde à 37°C avec 20 pmol de sonde RNaseAlert™ associés à 1 000 pmol d’un oligonucléotide complémentaire comme substrat.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.