ARCA (Anti-Reverse Cap Analog)

L’analogue de coiffe anti-inverse (ARCA) Ambion™ est un analogue de coiffe utilisé lors de la transcription in vitro pour la génération de transcripts à coiffe. L’ARCA est modifiée de manière à garantir l’incorporation dans l’orientation sens uniquement. L’analogue de coiffe anti-inverse est un analogue de coiffe modifié, dans lequel le groupe 3’ OH (plus proche de m⁷G) est remplacé par –OCH₃ (voir la figure). Suite à cette substitution, l’ARN polymérase peut uniquement initier la transcription avec le groupe hydroxyle restant, ce qui force l’incorporation de l’ARCA en orientation avant. Par conséquent, contrairement aux transcripts synthétisés avec un analogue de coiffe classique, 100 % des transcripts synthétisés avec l’ARCA à l’extrémité 5’ sont traductibles, ce qui conduit à un fort effet stimulateur sur la translation.

Contrôle de la qualité :
chaque analogue de coiffe est rigoureusement testé pour détecter la contamination des endonucléases non spécifiques, des exonucléases et de l’activité RNase. Chacun est également dosé pour une synthèse efficace des transcripts in vitro à coiffe en utilisant l’analogue de la coiffe dans la transcription fonctionnelle in vitro MEGAscript™ et les réactions de translation du lysat Retic.

Produits accessoires :
Des kits complets sont disponibles avec tous les réactifs nécessaires à la transcription in vitro des transcripts d’ARN à coiffe. Le kit mMESSAGE mMACHINE™ T7 Ultra comprend l’ARCA (réf. AM1345). Sont également disponibles des kits contenant l’analogue de coiffe classique ; des kits mMESSAGE mMACHINE™ T7 (réf. AM1344), T3 (réf. AM1348) et SP6 (réf. AM1340). Le lysat Retic IVT™ (réf. AM1200) pour la translation in vitro de l’ARNm est également disponible.