Kits de détection de l’apoptose par l’Annexine V eBioscience™
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Kits de détection de l’apoptose par l’Annexine V eBioscience™

Les kits utilisent l’annexine V conjuguée au colorant de viabilité pour marquer la phosphatidylsérine (PS), un marqueur précoce de l’apoptose, sur la membrane extracellulaire.
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RéférenceQuantitéExcitation / émissionConjugué
BMS500BT-300
également connu sous le numéro BMS500BT/300
300 dosagesNA, 535/NA, 617Biotine, iodure de propidium
88-8005-74200 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
88-8006-7250 dosages405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8006-74200 dosages405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8007-74200 dosages650, 535/660, 617APC, iodure de propidium
88-8008-7250 dosagesPCP-eFluor 710
88-8008-74200 testsPCP-eFluor 710
BMS500FI-100100 tests488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
BMS500FI-2020 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
BMS500FI-300300 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
88-8102-7250 dosagesPE, 7-AAD
88-8102-74200 dosagesPE, 7-AAD
88-8103-7250 dosagesPE/Cy7
88-8103-74200 dosagesPE/Cy7
BMS500BT-100
également connu sous le numéro BMS500BT/100
100 testsNA, 535/NA, 617Biotine, iodure de propidium
BMS500BT-20
également connu sous le numéro BMS500BT/20
20 dosagesNA, 535/NA, 617Biotine, iodure de propidium
88-8005-7250 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
88-8007-7250 dosages650, 535/660, 617APC, iodure de propidium
Référence BMS500BT-300
également connu sous le numéro BMS500BT/300
Prix (EUR)
453,65
線上優惠
604,00
Économisez 150,35 (25%)
Each
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Quantité:
300 dosages
Excitation / émission:
NA, 535/NA, 617
Conjugué:
Biotine, iodure de propidium
Prix (EUR)
453,65
線上優惠
604,00
Économisez 150,35 (25%)
Each
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Distinguez facilement les cellules soumises à une apoptose précoce et tardive grâce aux kits de détection d’apoptose eBioscience et Annexine V pour l’analyse de cytométrie en flux. Ces kits utilisent l’annexine V conjuguée au colorant de viabilité pour étiqueter la phosphatidylsérine (PS), un marqueur précoce de l’apoptose, sur la membrane extracellulaire. En fin d’apoptose, la membrane cellulaire ayant perdu son intégrité, l’annexine V et le colorant de viabilité traversent et se lient à la PS à l’intérieur de la membrane plasmique.
Les annexines sont une famille de protéines de liaison aux phospholipides calcium-dépendantes qui lient de préférence la phosphatidylsérine (PS). Dans des conditions physiologiques normales, la PS se trouve principalement dans le feuillet interne de la membrane plasmique. Au début de l’apoptose, la phosphatidylsérine (PS) perd sa répartition asymétrique à travers la bicouche des phospholipides et est transférée aux cellules de marquage du feuillet de la membrane extracellulaire comme cibles de la phagocytose. Une fois sur la surface externe de la membrane, la PS peut être détectée par l’annexine V marquée par fluorescence de manière calcium-dépendante.

Dans l’apoptose précoce, la membrane plasmique exclut les colorants de viabilité tels que l’iodure de propidium (IP), la 7-AAD ou les colorants de viabilité fixables tels que eFluor 450. Ces cellules se colorent avec l’annexine V mais pas avec un colorant de viabilité, ce qui distingue les cellules au début de l’apoptose. Cependant, en fin d’apoptose, la membrane cellulaire perd son intégrité, permettant ainsi à l’annexine V d’accéder également à la PS à l’intérieur de la cellule. Un colorant de viabilité peut être utilisé pour résoudre ces cellules apoptotiques et nécrotiques en phase tardive (positives à l’annexine V, au colorant de viabilité) à partir des cellules apoptotiques en phase précoce (positives à l’annexine V, négatives au colorant de viabilité).

Les colorants de viabilité actuels disponibles avec les kits de détection d’apoptose eBioscience Annexine V comprennent FITC, eFluor 450, allophycocyanine (APC), phycoérythrine (PE), PE-cyanine7, et biotine.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
DescriptionKit de détection de l’apoptose par l’annexine V-biotine eBioscience
Excitation / émissionNA, 535/NA, 617
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux
Contenus des kitsContenu :
• Tampon de liaison (4X), 2 flacons (50 ml)
• rh annexine V-biotine, 1 flacon (1,5 ml)
• Iodure de propidium, (20 µg/ml), 2 flacons (1,8 ml)
Type de produitKit de détection d’apoptose
Quantité300 dosages
Conditions d’expéditionGlace humide
ConjuguéBiotine, iodure de propidium
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conditions de manipulation :
Stocker entre 2 et 8°C. Évitez les variations de température.

Foire aux questions (FAQ)

Is annexin V specific for any particular species?

Annexin V binding of phospholipids is not species-specific. In the presence of millimolar concentrations of Ca2+, Annexin V binds to several phospholipids, but exhibits the highest affinity for phosphatidylserine. This feature is useful for screening cells undergoing apoptosis. Phosphatidylserine is usually distributed on the inner leaflet of the lipid bilayer, but when cells start to undergo apoptosis, the phosphatidylserine moves to the outer leaflet. The translocation of phosphatidylserine to the outer leaflet makes it available for Annexin V staining. Normal, intact cells will not stain with Annexin V, while cells undergoing apoptosis will be.

Annexin V staining can be visualized by fluorescence microscopy or flow cytometry using conjugates such as Annexin V-FITC, or Annexin V-biotin in conjugation with a streptavidin-conjugated fluorophore. It is important to note that experiments with Annexin V require that the cells under study are live cells with intact membranes. It is not suitable for use with fixed cells as the membrane develops holes during the fixation process, making the phosphatidylserine on the inner face of the membrane accessible for Annexin V binding. For similar reasons, this product is also not suitable for use with tissue sections. Because necrotic cells also have numerous membrane breaches, these cells are also often stained with Annexin V. A quick way to differentiate apoptotic from necrotic cells is with a double staining regime using Annexin V-FITC (green fluorescence) and the DNA staining dye propidium iodide (red fluorescence). Propidium iodide requires membrane breaches in order to gain access to the cell nucleus.

Using the Annexin V-FITC/propidium iodide double staining regime, the following staining patterns are observed with apoptotic and necrotic cells:
1. Cells that are normal will not stain with either Annexin V-FITC or propidium iodide (indicating no phosphatidylserine on the surface and no holes in the membrane).
2. Cells that are starting to undergo apoptosis will stain with Annnexin V-FITC only (indicating phosphatidylserine on the surface but no holes in the membrane).
3. Cells that are in late apoptosis and necrotic cells will stain with both Annexin V-FITC and with propidium iodide (indicating that we cannot tell where the phosphatidylserine is located and that there are holes in the membrane).

Phosphatidylserine is an ubiquitous membrane component among mammalian species; therefore, we believe that Annexin V has utility in monitoring apoptosis with any mammalian-derived cell line. One report (O'Brien et al., 1997) has even indicated its utility in monitoring apoptosis with plant cells. Dive, C., C.D. Gregory, D.J. Phipps, D.L. Evans, A.E. Milner, and A.H. Wyllie (1992) Analysis and discrimination of necrosis and apoptosis (programmed cell death) by multiparameter flow cytometry. Biochem. Biophys. Acta 1133:275-285. Koopman, G., C.P.M. Reutlingsperger, G.A.M. Kuitjen, R.M.J. Keehnen, S.T. Pals, and M.H.J. van Oers (1994) Annexin V for flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on B cells undergoing apoptosis. Blood 84:1415-1420. O'Brien, I.E., C.P. Reutelingsperger, and K.M. Holdaway (1997) Annexin-V and TUNEL use in monitoring the progression of apoptosis in plants. Cytometry 29(1):28-33.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can I use eFluor 450-conjugated antibodies with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits?

Yes, eFluor 450-conjugated antibodies are compatible with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits.

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