Kits de détection de l’apoptose par l’Annexine V eBioscience™

Distinguez facilement les cellules soumises à une apoptose précoce et tardive grâce aux kits de détection d’apoptose eBioscience et Annexine V pour l’analyse de cytométrie en flux. Ces kits utilisent l’annexine V conjuguée au colorant de viabilité pour étiqueter la phosphatidylsérine (PS), un marqueur précoce de l’apoptose, sur la membrane extracellulaire. En fin d’apoptose, la membrane cellulaire ayant perdu son intégrité, l’annexine V et le colorant de viabilité traversent et se lient à la PS à l’intérieur de la membrane plasmique.

Les annexines sont une famille de protéines de liaison aux phospholipides calcium-dépendantes qui lient de préférence la phosphatidylsérine (PS). Dans des conditions physiologiques normales, la PS se trouve principalement dans le feuillet interne de la membrane plasmique. Au début de l’apoptose, la phosphatidylsérine (PS) perd sa répartition asymétrique à travers la bicouche des phospholipides et est transférée aux cellules de marquage du feuillet de la membrane extracellulaire comme cibles de la phagocytose. Une fois sur la surface externe de la membrane, la PS peut être détectée par l’annexine V marquée par fluorescence de manière calcium-dépendante.

Dans l’apoptose précoce, la membrane plasmique exclut les colorants de viabilité tels que l’iodure de propidium (IP), la 7-AAD ou les colorants de viabilité fixables tels que eFluor 450. Ces cellules se colorent avec l’annexine V mais pas avec un colorant de viabilité, ce qui distingue les cellules au début de l’apoptose. Cependant, en fin d’apoptose, la membrane cellulaire perd son intégrité, permettant ainsi à l’annexine V d’accéder également à la PS à l’intérieur de la cellule. Un colorant de viabilité peut être utilisé pour résoudre ces cellules apoptotiques et nécrotiques en phase tardive (positives à l’annexine V, au colorant de viabilité) à partir des cellules apoptotiques en phase précoce (positives à l’annexine V, négatives au colorant de viabilité).

Les colorants de viabilité actuels disponibles avec les kits de détection d’apoptose eBioscience Annexine V comprennent FITC, eFluor 450, allophycocyanine (APC), phycoérythrine (PE), PE-cyanine7, et biotine.