Tampon Tango (10X)
Thermo Scientific™

Tampon Tango (10X)

Le tampon Thermo Scientific 10X Y garantit les conditions de réaction optimales pour les enzymes de restriction et est prémélangéAfficher plus
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RéférenceQuantité
BY55 x 1,0 ml
Référence BY5
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Le tampon Thermo Scientific 10X Y garantit les conditions de réaction optimales pour les enzymes de restriction et est prémélangé avec de la BSA pour une meilleure stabilité. Notre système à cinq tampons garantit des conditions de réaction optimales pour chaque enzyme de restriction. Ce système comprend des tampons 10X B (bleu), G (vert), O (orange), R (rouge) et Tango (jaune). Toutes les enzymes de restriction sont fournies dans des tubes à code couleur pour indiquer le tampon de réaction recommandé. Le tampon recommandé et/ou le tampon Tango universel sont fournis avec chaque enzyme.

Le tampon Tango a été conçu pour les digestions doubles d’ADN avec des enzymes de restriction classiques. Pour de plus amples informations, consultez l’outil Thermo Scientific DoubleDigest.

Pour garantir des performances constantes, les tampons d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA, ce qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants éventuellement présents dans les préparations d’ADN. Plusieurs cycles de congélation / décongélation des tampons ne provoquent pas de précipitation de la BSA.

Les enzymes de restriction Thermo Scientific présentent 100 % de leur activité certifiée dans le tampon recommandé. Cependant, certaines enzymes nécessitent des additifs pour atteindre l’activité à 100 %. Par exemple, AjuI, Alfl, BdaI, BplI, BseMII, FaqI, Eco57I, Eco57Ml, Hin4I et Tsol nécessitent une S-adénosylméthionine, qui est fournie avec l’enzyme, tandis que AarI et BveI nécessitent un oligonucléotide (également fourni avec l’enzyme). Esp3l nécessite du DTT.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de produitTampon Tango
Quantité5 x 1,0 ml
Concentration10X
Gamme de produitsTango
Catégorie de rechercheClonage traditionnel
Unit SizeEach

Foire aux questions (FAQ)

Can I double digest my DNA using a Thermo Scientific conventional restriction enzyme and a FastDigest restriction enzyme?

For optimal results with fast reaction and 100% buffer compatibility, we highly recommend using FastDigest restriction enzymes in double digestion. In certain cases however, it may be possible to perform double digestion using a mix of Thermo Scientific conventional and Fastdigest restriction enzymes. For specific recommendations, please contact our technical service with detailed information about the enzymes and DNA template you plan to use.

Why do you recommend only 2 µL of 10X Reaction Buffer when digesting unpurified PCR product in a 30 µL reaction?

We recommend only 2 µl 10X Buffer in digestion of unpurified PCR products in 30 ul since salts and ions from the PCR reaction would be carried over to the digestion reaction.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Restriction Enzyme Cloning Support Center.

What are key factors promoting star activity?

Star activty may be contributed by:

• Prolonged incubation
• High enzyme concentration
• High glycerol concentration (usually 5% or higher)
• Small reaction volume

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Unexpected DNA bands were observed on agarose gel electrophoresis after restriction digestion. What may have caused this?

Unexpected cleavage patterns may be caused by the following reasons:

• Star activity of the restriction enzyme: Make sure to follow the reaction recommendations as specified in the protocol. Star activity may be improved by changing several key factors such as decreasing the reaction time, increasing the reaction volume, and decreasing the enzyme amount.

• Partial or incomplete cleavage (incomplete restriction reaction): Efficiency of the enzyme can be improved by adding more enzyme, prolonging the reaction time, or purifying DNA samples to remove inhibitory contaminants.

• Contamination with non-specific endonucleases: Non-specific endonucleases may be introduced to the DNA sample and/or the enzyme from improper handling, pipetting, etc.

•Improper reaction setup: Mix the digestion reaction thoroughly.

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What are possible reasons for incomplete/failed restriction digestion?

The main reason for DNA cleavage reaction failure is the presence of contaminating inhibitors in the template DNA (for example: phenol, chloroform, detergents, ethanol, excess salts, EDTA, etc.). The best way to troubleshoot is to perform control reactions:

1) negative control (experimental DNA in the reaction buffer without the restriction enzyme) to access degradation of DNA by contaminants in the DNA template and/or reaction buffer
2) positive control reaction I (digestion of highly pure control DNA with the restriction enzyme) to access reaction conditions and enzyme activity
3) positive control reaction II (highly pure control DNA + experimental DNA + Restriction Enzyme) to access possible issues with the experimental DNA.

In addition, please check for sensitivity of the restriction enzymes to template DNA methylation.

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