Click-iT™ EdU Imaging Kit with Alexa Fluor™ 488, 594, and 647 Azides

Le kit d’imagerie Click-iT™ EdU est une version d’essai de notre alternative supérieure aux dosages de prolifération traditionnels optimisés pour les applications de microscopie par fluorescence. Dans ce dosage, l’EdU analogue à la thymidine modifiée est efficacement incorporé à l’ADN fraîchement synthétisé et il est marqué de façon fluorescente avec le colorant brillant et photostable Alexa Fluor™ dans une réaction clic rapide et hautement spécifique. Ce marquage fluorescent des cellules en prolifération est précis et compatible avec les méthodes d’anticorps en raison du protocole à clic léger. Ce kit de taille de dosage fournit suffisamment d’EDU pour marquer de 6 à 30 lamelles et suffisamment d’Alexa Fluor™ 488, 594 et 647 d’azide pour détecter une nouvelle synthèse d’ADN sur 2 à 10 lamelles avec chaque fluorophore.
• Simple—fonctionne dès la première fois, à chaque fois, en moins de temps
• Efficace—absence d’étapes de dénaturation ou de traitement rigoureux
• Résultats riches en contenu—meilleure conservation de la morphologie cellulaire, structure de l’antigène, et de l’intégrité de l’ADN
• Homogène—ne dépend pas des lots d’anticorps variables pour la détection

Les méthodes de détection de la prolifération les plus précises sont basées sur l’incorporation et la mesure d’analogues nucléosidiques dans l’ADN nouvellement synthétisé, avec la bromodésoxyuridine (BrdU) un analogue couramment utilisé. L’ADN marqué par le BrdU est quantifié à l’aide d’anticorps anti-BrdU suite à la dénaturation de l’ADN par des méthodes agressives (HCl, chaleur ou enzymes) afin d’exposer les molécules de BrdU. Cette étape est chronophage et difficile à réaliser de façon constante. Le traitement rigoureux peut également nuire à l’intégrité et à la qualité de l’échantillon, ce qui rend difficile la co-coloration avec d’autres anticorps.

Méthodologie de prolifération supérieure
Le kit d’imagerie Click-iT™ EdU offre une alternative supérieure aux dosages BrdU pour mesurer la prolifération cellulaire. L’EdU (5-éthynyl-2’-déoxyuridine) est un analogue nucléosidique de la thymidine ; il est incorporé à l’ADN au cours de la synthèse de l’ADN active. Avec le kit Click-iT™ EdU, une fixation légère et la perméabilisation du détergent suffisent pour que le réactif de détection basé sur les petites molécules Click-iT™ EdU ait accès à l’ADN. Par conséquent, le kit d’imagerie Click-iT™ EdU n’est pas seulement facile à utiliser, il est aussi plus précis et compatible avec l’analyse du cycle cellulaire et d’autres cibles intracellulaires ou extracellulaires pour des résultats vraiment riches en contenu.

Ce kit est optimisé pour les applications de microscopie par fluorescence ; visitez la zone de la technologie Click-iT™ de notre site Web pour les kits conçus pour les plateformes d’imagerie à haut contenu, de microplaques à fluorescence ou de cytométrie en flux.

En savoir plus sur la technologie Click-iT™

Remarques :
le dosage Click-iT™ peut être utilisé sur les cellules en culture ou in vivo après l’administration de l’EdU par des méthodes d’alimentation ou d’injection.
Le dosage Click-iT™ peut être utilisé avec la BrdU dans des expériences à impulsion double en utilisant l’anticorps anti-BrdU (clone MoBu-1), qui n’interfère pas avec l’EdU.
La technologie Click-iT™ est compatible avec les colorants immunohistochimiques, immunocytochimiques et fluorescents tolérants à la fixation ou conçus pour le marquage des cellules fixées.