CellLight™ Mitochondria-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Mitochondria-GFP, BacMam 2.0
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CellLight™ Mitochondria-GFP, BacMam 2.0

Les mitochondries-GFP CellLight™, BacMam 2.0, offrent un moyen facile de marquer les mitochondries avec la protéine verte fluorescente (GFP) dansAfficher plus
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Les mitochondries-GFP CellLight™, BacMam 2.0, offrent un moyen facile de marquer les mitochondries avec la protéine verte fluorescente (GFP) dans les cellules vivantes. Il vous suffit d’ajouter le réactif à vos cellules et de laisser incuber pendant une nuit. Les cellules sont prêtes à être observées au matin.

Vous souhaitez marquer d’autres structures cellulaires ? En savoir plus sur les outils de marquage des protéines fluorescentes CellLight™

Cette construction prête à l’emploi est transfectée dans des cellules à l’aide de la technologie BacMam 2.0, où elle exprime les GFP fusionnées à la séquence principale de l’alpha pyruvate deshydrogénase E1. Vous pouvez observer le comportement des mitochondries-GFP dans des cellules vivantes indépendamment du potentiel de la membrane mitochondriale et marquer des cellules vivantes avec plusieurs colorants de suivi ou de traçage afin d’identifier des processus cellulaires dynamiques.

Les cellules exprimant les constructions CellLight™ peuvent également être fixées avec du formaldéhyde pour l’imagerie multiplexée à l’aide de techniques immunocytochimiques.

La technologie CellLight™ est :
Rapide et pratique : ajoutez simplement le réactif CellLight™ à vos cellules, laissez incuber pendant la nuit et imagez ; ou stocker les cellules congelées et prêtes pour essai pour une utilisation ultérieure
Très efficace : jusqu’à 90 % de transduction d’un large éventail de lignées cellulaires de mammifères, notamment des cellules primaires, des cellules souches et des neurones
Flexible : effectuez la cotransduction de plusieurs réactifs BacMam pour des expériences multiplexes ou des études de colocalisation ; contrôlez rigoureusement les niveaux d’expression simplement en variant la dose
Moins toxique : Les réactifs CellLight™ ne se répliquent pas dans les cellules de mammifères et conviennent à la manipulation de niveau de sécurité biologique (BSL) 1

Technologie BacMam
Les mitochondries-GFP CellLight™, BacMam 2.0, sont une construction de fusion de la séquence principale de l’alpha pyruvate deshydrogénase E1 et de l’emGFP, fournissant un ciblage précis et spécifique des mitochondries-GFP cellulaires. Cette construction de fusion est conditionnée dans le virus d’insecte baculovirus, qui ne se réplique pas dans les cellules humaines et qui est désigné comme pouvant être utilisé en toute sécurité dans la plupart des laboratoires appliquant le niveau de sécurité biologique (BSL) 1. La technologie BacMam garantit que la plupart des types de cellules de mammifères sont transduits / transfectés avec une haute efficacité et une toxicité minimale. Cette transfection transitoire peut être détectée après une incubation d’une nuit, et ce pendant cinq jours maximum, offrant suffisamment de temps pour réaliser la plupart des analyses cellulaires dynamiques. Comme toute technique de transfection / transduction, la méthode BacMam ne transfecte / transduit pas toutes les cellules avec la même efficacité, ce qui la rend peu adaptée à des études de population cellulaire ou à une imagerie / numération automatisée. Les réactifs CellLight™ conviennent parfaitement aux expériences où la colocalisation cellulaire ou infracellulaire est nécessaire, ou aux études de la fonction cellulaire qui requièrent une résolution spéciale.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
CouleurVert
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantGFP (EmGFP)
ÉmissionVisible
Gamme de longueur d’onde d’excitation488 / 510
À utiliser avec (équipement)Microscope confocal, microscope à fluorescence
FormeLiquide
Gamme de produitsCellLight
Quantité1 flacon
Conditions d’expéditionGlace humide
TechniqueIntensité de fluorescence
Type d’étiquetteProtéine fluorescente
Type de produitMitochondrie
SubCellular LocalizationMitochondrie
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver entre 2°C et 6°C, à l’abri de la lumière. Ne pas congeler.

Foire aux questions (FAQ)

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations et références (30)

Citations et références
Abstract
Standardized mitochondrial analysis gives new insights into mitochondrial dynamics and OPA1 function.
Authors:Chevrollier A, Cassereau J, Ferré M, Alban J, Desquiret-Dumas V, Gueguen N, Amati-Bonneau P, Procaccio V, Bonneau D, Reynier P,
Journal:Int J Biochem Cell Biol
PubMed ID:22433900
'Mitochondria form dynamic tubular networks through processes of fission and fusion. Defect in mitochondrial dynamics lead to various pathologies, including several common and some rare neurodegenerative disorders. OPA1 and MFN2 are two key players in mitochondrial fusion associated with Autosomal Dominant Optic Atrophy and Charcot Marie Tooth neuropathy type 2A ... More
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