CellLight™ Mitochondria-RFP, BacMam 2.0

Les mitochondries-RFP CellLight™, BacMam 2.0, offrent un moyen facile de marquer les mitochondries avec la protéine rouge fluorescente (RFP) dans les cellules vivantes. Il vous suffit d’ajouter le réactif à vos cellules et de laisser incuber pendant une nuit. Les cellules sont prêtes à être observées au matin.

Vous souhaitez marquer d’autres structures cellulaires ? En savoir plus sur les outils de marquage des protéines fluorescentes CellLight™

Cette construction prête à l’emploi est transfectée dans des cellules à l’aide de la technologie BacMam 2.0, où elle exprime les RFP fusionnées à la séquence principale de l’alpha pyruvate deshydrogénase E1. Vous pouvez observer le comportement des mitochondries-RFP dans des cellules vivantes indépendamment du potentiel de la membrane mitochondriale et marquer des cellules vivantes avec plusieurs colorants de suivi ou de traçage afin d’identifier des processus cellulaires dynamiques.

Les cellules exprimant les constructions CellLight™ peuvent également être fixées avec du formaldéhyde pour l’imagerie multiplexée à l’aide de techniques immunocytochimiques.

La technologie CellLight™ est :
• Rapide et pratique : ajoutez simplement le réactif CellLight™ à vos cellules, laissez incuber pendant la nuit et imagez ; ou stocker les cellules congelées et prêtes pour essai pour une utilisation ultérieure
• Très efficace : jusqu’à 90 % de transduction d’un large éventail de lignées cellulaires de mammifères, notamment des cellules primaires, des cellules souches et des neurones
• Flexible : effectuez la cotransduction de plusieurs réactifs BacMam pour des expériences multiplexes ou des études de colocalisation ; contrôlez rigoureusement les niveaux d’expression simplement en variant la dose
• Moins toxique : Les réactifs CellLight™ ne se répliquent pas dans les cellules de mammifères et conviennent à la manipulation de niveau de sécurité biologique (BSL) 1

Technologie BacMam
Les mitochondries-RFP CellLight™, BacMam 2.0, sont une construction de fusion de la séquence principale de l’alpha pyruvate deshydrogénase E1 et de TagRFP, fournissant un ciblage précis et spécifique des mitochondries-RFP cellulaires. Cette construction de fusion est conditionnée dans le virus d’insecte baculovirus, qui ne se réplique pas dans les cellules humaines et qui est désigné comme pouvant être utilisé en toute sécurité dans la plupart des laboratoires appliquant le niveau de sécurité biologique (BSL) 1. La technologie BacMam garantit que la plupart des types de cellules de mammifères sont transduits / transfectés avec une haute efficacité et une toxicité minimale. Cette transfection transitoire peut être détectée après une incubation d’une nuit, et ce pendant cinq jours maximum, offrant suffisamment de temps pour réaliser la plupart des analyses cellulaires dynamiques. Comme toute technique de transfection / transduction, la méthode BacMam ne transfecte / transduit pas toutes les cellules avec la même efficacité, ce qui la rend peu adaptée à des études de population cellulaire ou à une imagerie / numération automatisée. Les réactifs CellLight™ conviennent parfaitement aux expériences où la colocalisation cellulaire ou infracellulaire est nécessaire, ou aux études de la fonction cellulaire qui requièrent une résolution spéciale.