Kit de prolifération cellulaire violet CellTrace™, pour cytométrie en flux

Le kit de prolifération cellulaire violet CellTrace™ est utilisé pour le marquage in vitro et in vivo des cellules afin de tracer plusieurs générations à l’aide de la dilution de colorants par cytométrie de flux.

• Performance supérieure — la coloration vive à pic simple permet de visualiser plusieurs générations
• Stabilité du signal à long terme — bien retenu dans les cellules pendant plusieurs jours après la coloration
•Polyvalence— plusieurs couleurs sont disponibles pour une association aisée avec des anticorps ou des marqueurs de fonction cellulaire, comme GFP
• Protocole de coloration simple et robuste

Consultez un guide de sélection pour tous™ les kits de prolifération cellulaire CellTrace pour la cytométrie en flux.

Coloration fluorescente supérieure
Une analyse de prolifération réussie par dilution de colorant (voir la figure ci-dessous) nécessite un colorant extrêmement lumineux pour distinguer les cellules marquées par fluorescence de l’auto-fluorescence après plusieurs divisions cellulaires. La coloration fluorescente intense procurée par le colorant violet CellTrace™ permet la visualisation de dix générations ou plus de cellules en prolifération avant que le signal soit submergé par l’auto-fluorescence intrinsèque des cellules. Une coloration homogène et uniforme entraîne très peu de variation de fluorescence entre les cellules d’une population, de sorte que des générations distinctes peuvent être observées sans aucune exigence de logiciel de modélisation complexe.

Rétention du signal à long terme
Contrairement aux colorants qui marquent la membrane lipidique des cellules, la coloration CellTrace™ Violet traverse facilement la membrane plasmique et se lie de façon covalente à l’intérieur des cellules où le colorant fluorescent stable et bien retenu fournit un signal constant, même après plusieurs jours dans un environnement de culture cellulaire. Le colorant violet CellTrace™ se lie covalemment à toutes les amines libres à la surface et à l’intérieur des cellules et montre peu de cytotoxicité, avec un effet minimal observé sur la capacité de prolifération ou la biologie des cellules.

Multiplexage facile avec d’autres fluorophores
L’excitation violette et l’émission étroite de colorant violet CellTrace™ en font un idéal pour le multiplexage en raison du chevauchement spectral limité avec d’autres colorants courants (Alexa Fluor™ 488, FITC et RPE) et des protéines fluorescentes (protéine fluorescente verte (GFP) et mCherry) (voir Spectra de fluorescence pour la coloration au violet CellTrace™ ci-dessous).

Protocole de coloration simple et robuste
Le kit de prolifération cellulaire violet CellTrace™ contient des flacons à usage unique pratiques de colorant sec permettant des expériences à petite échelle sans préparation de quantités excessives de colorant. Une solution de réserve est préparée en dissolvant le contenu d’un flacon dans du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre avant l’utilisation. Pour colorer 1 ml de cellules dans un milieu de culture exempt de protéines, il suffit en général d’utiliser 1 µl de cette solution de réserve. Les cellules doivent être colorées pendant 20 minutes à température ambiante en agitant doucement. Un bref lavage avec du milieu complet pourra alors absorber tout colorant restant dans la solution.