Kit de prolifération cellulaire CellTrace™ Far Red pour cytométrie en flux
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Kit de prolifération cellulaire CellTrace™ Far Red pour cytométrie en flux

Le kit de prolifération cellulaire rouge lointain CellTrace™ est utilisé pour le marquage in vitro et in vivo des cellulesAfficher plus
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RéférenceQuantité
C345641 kit(s)
C3457220 dosages
Référence C34564
Prix (EUR)
422,65
Online Exclusive
564,00
Économisez 141,35 (25%)
Each
Quantité:
1 kit(s)
Prix (EUR)
422,65
Online Exclusive
564,00
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Each
Le kit de prolifération cellulaire rouge lointain CellTrace™ est utilisé pour le marquage in vitro et in vivo des cellules afin de tracer plusieurs générations à l’aide de la dilution des colorants par cytométrie de flux.

• Performance supérieure : la coloration vive à pic simple permet de visualiser plusieurs générations
• Stabilité du signal à long terme : bien retenu dans les cellules pendant plusieurs jours après la coloration
• Polyvalence : plusieurs couleurs sont disponibles pour une association aisée avec des anticorps ou des marqueurs de fonction cellulaire (comme la GFP)
• Protocole de coloration simple et fiable

Consultez un guide de sélection pour tous les kits de prolifération cellulaire CellTrace™ pour la cytométrie en flux.

Coloration fluorescente supérieure
Une analyse de prolifération par dilution de colorants réussie nécessite un colorant de couleur extrêmement brillante pour distinguer les cellules marquées de façon fluorescente de l’autofluorescence après plusieurs divisions cellulaires. La coloration fluorescente intense procurée par le colorant rouge lointain CellTrace™ permet la visualisation de six générations ou plus de cellules proliférant avant que le signal soit submergé par l’auto-fluorescence intrinsèque des cellules. Ce kit permet des résultats de coloration homogènes et constants avec très peu de variation de la fluorescence entre les cellules d’une population, si bien que les générations distinctes sont visibles sans que l’utilisation d’un logiciel complexe de modélisation ne soit nécessaire.

Rétention du signal à long terme
Contrairement aux colorants qui marquent la membrane lipidique des cellules, le colorant rouge lointain CellTrace™ traverse facilement la membrane plasmidique et se lie de façon covalente à l’intérieur des cellules où le colorant fluorescent, bien retenu et stable, offre un signal constant, même après plusieurs jours dans un environnement de culture cellulaire. Le colorant rouge lointain CellTrace™ se lie de façon covalente à toutes les amines libres à la surface et à l’intérieur des cellules et présente peu de cytotoxicité, avec un effet minimal observé sur la capacité de prolifération ou sur la biologie des cellules.

Multiplexage facile avec d’autres fluorophores
L’excitation rouge à 630 nm et l’émission à 661 nm font du colorant rouge lointain CellTrace™ un colorant idéal pour le multiplexage en raison du chevauchement spectral limité avec d’autres colorants courants (Alexa Fluor™ 488, FITC et RPE) et protéines fluorescentes (protéine verte fluorescente ou GFP et mCherry).

Protocole de coloration simple et fiable
Le kit de prolifération cellulaire rouge lointain CellTrace™ contient des flacons de colorant sec jetables pratiques pour permettre de réaliser des expériences à petite échelle sans préparer des quantités excessives de colorant. Une solution de réserve est préparée en dissolvant le contenu d’un flacon dans du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre avant l’utilisation. Pour colorer 1 ml de cellules dans un milieu de culture exempt de protéines, il suffit en général d’utiliser 1 µl de cette solution de réserve. Les cellules doivent être colorées pendant 20 minutes à température ambiante en agitant doucement. Un bref lavage avec du milieu complet pourra alors absorber tout colorant restant dans la solution.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantContient 9 flacons de rouge lointain CellTrace™ (poudre lyophilisée) et 1 flacon de DMSO (500 μl)
FormeLyophilisé(e)
FormatTube(s)
Quantité1 kit(s)
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Emission633/635
À utiliser avec (application)Test de prolifération
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux
Gamme de produitsCellTrace
Type de produitKit de prolifération cellulaire
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contient 9 flacons de rouge lointain CellTrace™ (poudre lyophilisée) et 1 flacon de DMSO (500 μl) Conserver au congélateur (-5 et -30°C).

Foire aux questions (FAQ)

What is the approximate excitation and emission peaks of the CellTrace Far Red Proliferation reagent?

The approximate excitation and emission peaks of this product after hydrolysis are 630 nm and 661 nm, respectively. Cells labeled with CellTrace Far Red reagent can be visualized by fluorescence microscopy using standard Cy 5 filter sets or analyzed by flow cytometry in an instrument equipped with a 633/635 nm excitation source and APC channel.

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I want to do a cell migration study for around 4 hours and need to fluorescently label the cells with a dye. What do you recommend?

Calcein, AM and FDA (fluorescein diaceate) are examples of some dyes used for this application. Since these dyes are not incorporated or covalently attached to any cellular components, they may have a short retention time as some cell types may actively efflux the dye out of the cells. The CellTracker and CellTrace dyes include either a mild thiol-reactive chloromethyl group or amine-reactive succinnimidyl ester group to allow for covalent binding to cellular components, providing for better retention. As with any reagent, one should empirically determine retention times for the cell type used.

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I labeled my cells with Calcein, AM, but when I imaged the next day, there was no fluorescence from Calcein. Why?

Calcein, AM is a good choice for cell tracking and as a general cytoplasmic stain. However, it doesn't bind to anything and may be actively pumped out of the cells within a couple hours, which is likely what happened. The retention of Calcein within live cells is dependent upon the inherent properties of the cell type and culture conditions.

For long-term imaging, you may wish to consider a reactive cytoplasmic stains such as CFDA, SE or the CellTracker and CellTrace dyes.

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Can the CellTrace Far Red dye be fixed with paraformaldehyde (PFA)?

Yes, the CellTrace Far Red dye can be fixed with paraformaldehyde (PFA). The dye covalently binds to cells and will not wash out after permeabilization or fixation.

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I would like to label two cell populations with two different CellTrace reagents and then co-culture these cells. Will the CellTrace reagent leave the cells to stain other cells?

We have not tested the use of the CellTrace reagents for co-culture applications. In theory, this may work, but you would have to test this on your cells of interest.

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Citations et références (2)

Citations et références
Abstract
Appraising the suitability of succinimidyl and lipophilic fluorescent dyes to track proliferation in non-quiescent cells by dye dilution.
Authors:Filby A, Begum J, Jalal M, Day W,
Journal:
PubMed ID:25802116
Successful completion of the cell cycle usually results in two identical daughter progeny. This process of generational doubling is termed proliferation and when it occurs in a regulated fashion the benefits range from driving embryonic development to mounting a successful immune response. However when it occurs in a dis-regulated fashion, ... More
Isolation and Activation of Murine Lymphocytes.
Authors:Lim JF, Berger H, Su IH
Journal:J Vis Exp
PubMed ID:27842342
'B and T cells, with their extremely diverse antigen-receptor repertoires, have the ability to mount specific immune responses against almost any invading pathogen(1,2). Understandably, such intricate abilities are controlled by a large number of molecules involved in various cellular processes to ensure timely and spatially regulated immune responses(3). Here, we ... More