Dextran, Alexa Fluor™ 568; 10,000 MW, Anionic, Fixable
Dextran, Alexa Fluor™ 568; 10,000 MW, Anionic, Fixable
Invitrogen™

Dextran, Alexa Fluor™ 568; 10,000 MW, Anionic, Fixable

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D22912
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Les dextranes marqués sont des polysaccharides hydrophiles qui sont le plus couramment utilisés dans des études de microscopie pour surveiller la division cellulaire, suivre le mouvement des cellules vivantes et établir des rapports sur les propriétés hydrodynamiques de la matrice cytoplasmique. Le dextrane marqué est couramment introduit dans les cellules par micro-injection.

Besoin d’un spectre d’émission différent ou d’un suivi plus long ? Consultez nos autres produits de suivi de cellules de mammifères.

Spécifications du dextrane :

Marquage (Ex/Em) : Alexa Fluor™ 568 (578/603)
Taille : 10 000 MW
Charge : Anionique
Fixable : Fixable par amines libres

Normes de fabrication strictes de Molecular Probes™ Dextranes
Nous proposons plus de 50 conjugués de dextrane fluorescents et biotinylés dans plusieurs gammes de poids moléculaire. Les dextranes sont des polysaccharides hydrophiles caractérisés par leur poids moléculaire de modéré à élevé, une bonne hydrosolubilité et une faible toxicité. Ils présentent également une faible immunogénicité. Les dextranes sont biologiquement inertes en raison de leurs liaisons poly-(α-D-1,6-glucose) peu communes, qui les rendent résistantes au clivage par la plupart des glycosidases cellulaires endogènes.

Dans la plupart des cas, les dextranes fluorescentes Molecular Probes™ sont beaucoup plus brillantes et ont une charge négative plus élevée que les dextranes disponibles auprès d’autres sources. De plus, nous utilisons des méthodes rigoureuses pour éliminer le plus de colorants non conjugués possible, puis doser nos conjugués de dextrane par chromatographie sur couche mince pour assurer l’absence de contaminants à faible poids moléculaire.

Une large sélection de substituants et de poids moléculaires
Les dextranes Molecular Probes™ sont conjugués à la biotine ou à une grande variété de fluorophores, dont sept de nos colorants Alexa Fluor™ (Conjugués de dextrane Molecular Probes-Tableau 14.4) et sont disponibles dans les poids moléculaires nominaux suivants (MW) : 3 000 ; 10 000 ; 40 000 ; 70 000 ; 500 000 ; et 2 000 000 daltons.

Charge nette et fixabilité du dextrane
Nous utilisons le couplage succinimidyle de nos colorants à la molécule de dextrane, ce qui, dans la plupart des cas, produit un dextrane neutre ou anionique. La réaction utilisée pour produire les dextranes Rhodamine Green™ et Alexa Fluor 488 génère un produit final neutre, anionique ou cationique. Les dextranes Alexa Fluor, Cascade Blue, jaune lucifer, fluorescéine et Oregon Green sont intrinsèquement anioniques, tandis que les dextranes marqués avec de la rhodamine B zwitterionique, de la tétraméthylrhodamine et du Texas Red™ sont essentiellement neutres. Pour produire des dextranes plus fortement anioniques, nous avons développé une procédure exclusive pour ajouter des groupes chargés négativement aux portoirs de dextranes ; ces produits sont désignés sous le terme de dextranes “polyanioniques” .

Certaines applications nécessitent que le traceur de dextrane soit traité avec du formaldéhyde ou du glutaraldéhyde pour une analyse ultérieure. Pour ces applications, nous offrons des versions “fixables par lysine” de la plupart de nos conjugués de dextranes de fluorophores ou de biotine. Ces dextranes possèdent des résidus de lysine liés de manière covalente qui permettent aux traceurs de dextrane d’être conjugués à des biomolécules environnantes par fixation médiée par aldéhyde pour détection subséquente par des techniques immunohistochimiques et ultrastructurelles. Nous avons également montré que tous nos conjugués de dextrane Alexa Fluor de 10 000 MW pouvaient être fixés avec des fixateurs à base d’aldéhyde.

Applications clés qui utilisent des dextranes marqués
Il existe une multitude de citations qui décrivent l’utilisation de dextranes marqués. Certaines des utilisations les plus courantes incluent :

Traçage neuronal (antérograde et rétrograde) dans les cellules vivantes
Traçage de lignées cellulaires dans les cellules vivantes
Traçage neuroanatomique
Examen des communications intercellulaires (par exemple, dans les jonctions lacunaires, pendant la cicatrisation des plaies, et pendant le développement embryonnaire)
Étude de la perméabilité vasculaire et de l’intégrité de la barrière hémato-encéphalique
Suivi de l’endocytose
Surveillance de l’acidification (certains conjugués de colorant-dextrane sont sensibles au pH)
Étude des propriétés hydrodynamiques de la matrice cytoplasmique

À des fins de recherche uniquement. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Marqueur ou colorantColorants Alexa Fluor
Type de produitDextrane
Quantité5 mg
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Excitation/Emission578/603 nm
Gamme de produitsAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conservez au congélateur (entre -5 et -30°C) à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

I can't see the structural details of neurons when I inject my fluorescent dextran. What can I do to improve the detailed structure?

If you want to see the most detailed structure you should use the low molecular weight conjugated dextrans such as the 3,000 MW dextrans.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Why isn't my fluorescently conjugated dextran signal retained after fixation?

Ensure that the dextran you are using is the fixable form (i.e., contains a primary amine). Dextrans that do not contain a primary amine will not be fixed. Another factor could be that the concentration of the dextran is too low, and the concentration use can be increased up to 10 mg/mL.

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What are the charges of the dextrans?

We do not determine the net charge of the dextran conjugates. The net charge depends on the fluorophore used to label the dextran and the method of preparing the conjugate. We label some dextrans as neutral or anionic based on the fluorophore used, however the net charge of the dextran may not always be the same as the dye. The Alexa Fluor, Cascade Blue, Lucifer Yellow, fluorescein, and Oregon Green dextrans are intrinsically anionic, whereas most of the dextrans labeled with the zwitterionic Rhodamine B, tetramethylrhodamine and Texas Red dyes are essentially neutral.

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What size dextran is best for neuronal tracing?

Dextrans with molecular weights from 3,000 to 70,000 have been used, however the 3,000 and 10,000 MW dextrans are most commonly used for neuronal tracing. The 3,000 MW dextrans are used for more detailed tracing of fine neuronal projections, investigating gap junctions, and diffuse more quickly; while the 10,000 MW dextrans have slower distribution, longer cellular retention, and do not cross gap junctions.

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Do you have a neuronal tracing protocol?

The NeuroTrace BDA-10,000 Neuronal Tracer Kit (Cat. No. N7167) manual has a good protocol for injection procedures and neuronal tracing using the10,000 MW lysine-fixable biotin dextran amine (BDA). This protocol could potentially be applied to other fluorescent dextrans.

Please review Tables 1a and 1b on pages 4 and 5 - https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/mp07167.pdf

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Citations et références (18)

Citations et références
Abstract
Visually guided injection of identified reticulospinal neurons in zebrafish: a survey of spinal arborization patterns.
Authors:Gahtan E, O'Malley DM
Journal:J Comp Neurol
PubMed ID:12640669
'We report here the pattern of axonal branching for 11 descending cell types in the larval brainstem; eight of these cell types are individually identified neurons. Large numbers of brainstem neurons were retrogradely labeled in living larvae by injecting Texas-red dextran into caudal spinal cord. Subsequently, in each larva a ... More
Beclin1-binding UVRAG targets the class C Vps complex to coordinate autophagosome maturation and endocytic trafficking.
Authors:Liang C, Lee JS, Inn KS, Gack MU, Li Q, Roberts EA, Vergne I, Deretic V, Feng P, Akazawa C, Jung JU,
Journal:Nat Cell Biol
PubMed ID:18552835
'Autophagic and endocytic pathways are tightly regulated membrane rearrangement processes that are crucial for homeostasis, development and disease. Autophagic cargo is delivered from autophagosomes to lysosomes for degradation through a complex process that topologically resembles endosomal maturation. Here, we report that a Beclin1-binding autophagic tumour suppressor, UVRAG, interacts with the ... More
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PubMed ID:16818719
'Under experimental conditions, the Golgi apparatus can undergo de novo biogenesis from the endoplasmic reticulum (ER), involving a rapid phase of growth followed by a return to steady state, but the mechanisms that control growth are unknown. Quantification of coat protein complex (COP) II assembly revealed a dramatic up-regulation at ... More
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Journal:Nat Methods
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