Réactif de viabilité cellulaire HS alamarBlue™

Le réactif de viabilité cellulaire HS alamarBlue est une solution à base de résazurine prête à l’emploi qui fonctionne comme un indicateur de santé cellulaire en ayant recours à la puissance de réduction des cellules vivantes pour effectuer une mesure quantitative de la viabilité. En entrant dans les cellules vivantes, la résazurine est réduite à la résorufine, un composé de couleur rouge et très fluorescent. La fluorescence de fond élevée provoquée par divers contaminants réduit les performances des réactifs à base de résazurine. Afin d’améliorer les performances, un procédé de purification innovant a été mis au point pour éliminer ces contaminants. Cette résazurine hautement purifiée et non toxique a été utilisée dans la formulation standard alamarBlue, créant ainsi le réactif de viabilité cellulaire multicomposant alamarBlue HS. Les changements de viabilité peuvent être facilement détectés à l’aide d’un lecteur de plaques à base d’absorbance ou de fluorescence. Le réactif de viabilité cellulaire alamarBlue HS a une large applicabilité et peut être utilisé avec diverses lignées cellulaires humaines et animales, bactéries, plantes et champignons.

Les caractéristiques du réactif de viabilité cellulaire alamarBlue HS incluent :
• Élimination des contaminants de la résazurine—affiche une réduction supérieure à 50 % de la fluorescence de fond
• Rapport signal/arrière-plan augmenté de plus de 100 %—donne une grande fenêtre de signal de test
• Réactif très sensible avec une réponse linéaire—détecte une quantité aussi faible que 20 cellules par puits
• Format pratique add-and-read—pas de mélange, pas de lavage, pas de lyse cellulaire et compatible avec l’instrumentation basée sur la fluorescence ou l’absorbance
• Mesure la viabilité de nombreux types de cellules différents—y compris les cellules de mammifères, les bactéries, les plantes et les champignons

La mesure des changements dans la viabilité cellulaire est une méthode fondamentale pour évaluer la santé cellulaire, déterminer la génotoxicité et évaluer les médicaments anticancéreux. La santé cellulaire peut être surveillée en détectant les changements dans plusieurs indicateurs clés, y compris les changements dans l’intégrité de la membrane plasmique, la synthèse d’ADN, la teneur en ADN, l’activité enzymatique, la présence d’ATP et l’environnement réducteur cellulaire.

La surveillance des modifications de l’environnement de réduction cellulaire ou de l’activité métabolique à l’aide de réactifs à base de résazurine est un indicateur bien établi et fiable de la viabilité ou de la mort des cellules. En entrant dans les cellules vivantes, l’environnement réducteur réduit la résazurine à la résorufine, un composé de couleur rouge et très fluorescent. Les cellules viables convertissent continuellement la résazurine en résorufine, augmentant ainsi la fluorescence globale du milieu entourant les cellules. De plus, la conversion de la résazurine en résorufine entraîne un changement de couleur prononcé, ainsi la viabilité cellulaire peut également être détectée à l’aide de lecteurs de plaques basés sur l’absorbance.

En conséquence des processus de synthèse et de fabrication, tous les réactifs à base de résazurine contiennent une quantité détectable de contamination par la résorufine. La quantité de contamination peut varier considérablement entre les sources du matériau et les conditions de fabrication, ce qui contribue à des différences dans la fluorescence de fond détectable. Plus important encore, la résorufine contaminante réduit le rapport signal/fond et la plage dynamique du dosage. Un procédé innovant a été développé pour éliminer la résorufine contaminante, permettant d’obtenir la résazurine très pure utilisée dans le réactif de viabilité cellulaire alamarBlue HS.

Le réactif de viabilité cellulaire alamarBlue HS est un réactif complet add-and-read, non toxique qui ne nécessite pas de lyse cellulaire. La résazurine hautement purifiée utilisée pour le réactif alamarBlue HS entraîne une diminution de plus de 50 % de la fluorescence de fond et une augmentation de plus de 100 % du rapport signal/fond. Étant donné qu’aucune lyse n’est nécessaire, la solution diluée alamarBlue HS peut être retirée et remplacée par un milieu de croissance complet pour poursuivre la culture des cellules. Similaire au réactif alamarBlue, le réactif alamarBlue HS affiche une fenêtre de temps de détection de viabilité prolongée pour une grande variété d’organismes et peut donc être utilisé avec diverses lignées cellulaires humaines et animales, des bactéries, des plantes et des champignons, entraînant ainsi une mesure quantitative de la viabilité et de la prolifération cellulaires.