Thermo Scientific™

DH5α Competent Cells for Subcloning

Référence	Quantité
EC0111	4 x 500 μl

Référence EC0111

Prix (EUR)

65,65

Online Exclusive

70,25

Économisez 4,60 (7%)

Quantité:

4 x 500 μl

Grand volume ou format personnalisé

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α Les cellules compétentes Thermo Scientific DH5 pour le sous-clonage sont des cellules E. coli chimiquement compétentes recommandées pour le sous-clonage de routine dans des vecteurs plasmidiques. Les cellules d'efficacité du sous-clonage ne conviennent pas à la génération de bibliothèques d'ADNc. φΔLe Marquage 80dlacZ M15 fournit α-complémentation du βgène -galactosidase à partir de pUC ou de vecteurs similaires pour permettre le criblage de colonies bleues/blanches sur des plaques de gélose bactérienne contenant du Bluo-Gal ou du X-Gal.

• Efficacité de la transformation : > 1 x 10⁶ cfu/µg d’ADN pUC19
• Convient aux applications de clonage courantes
• Emballage économique pratique
• Contient des marqueurs génétiques qui permettent l’analyse de colonies bleues / blanches

Applications
Les cellules compétentes DH5α pour le sous-clonage conviennent aux applications de clonage d’ADN standard :
• Clonage d'ADN suite à des réactions de PCR ou de digestion par restriction
• Subcloning (Transfert de l'ADN d'un vecteur parent vers un vecteur de destination)
• Isolement plasmidique

Genotype
F– φ80lacZΔ M15 Δ (lacZYA-argF) U169 recA1 ENDA1 hsdR17 (rK– mK+) PhoA SUPE44 λ- thi–1 gyrA96 relA1

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications

Souche bactérienne ou de levuresDH5α

Sélection bleue / blancheOui

Type de celluleChimiquement compétent

Clonage d’ADN méthyléNon

Contient l’épisome FAbsence d’épisome F’

Efficacité1 x 10^6 cfu/µg

À utiliser avec (application)Clonage

Compatibilité à haut débitNon compatible avec le haut débit

Gamme de produitsThermo Scientific

Type de produitCellule compétente

Propagation de vecteurs ccdBPas pour la propagation de vecteur ccdB

Quantité4 x 500 μl

Conditions d’expéditionGlace carbonique

FormatTube

EspècesE. coli

Unit SizeEach

Contenu et stockage

• 4 cellulesα compétentes DH5 pour le sous-clonage (500 µL)
• d'ADN pUC19 (50 µL) (100 pg/µL)

Conserver à -80°C.

Foire aux questions (FAQ)

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

I'm getting overgrowth of colonies. Why?

Ensure that you are using the correct antibiotic at the appropriate concentration. Additionally, make sure the antibiotic is not expired. If colonies exhibit unexpected morphologies, contamination could be a factor. Check your S.O.C. medium and LB growth medium.

I'm only getting white colonies, but none of the clones have an insert. What can I do?

Here are a few suggestions:

- Small fragments/linkers are cloning in to your vector instead of your insert; to correct this, gel-purify the insert before ligation
- Ensure that the correct concentrations of X-gal and/or IPTG (if vector contains the lacIq marker) are used
- If spreading X-gal and/or IPTG on your plate, allow sufficient time for the reagents to diffuse into the plate
- Incubate your plate for a longer period to ensure full color development

I'm getting no colonies at all on my plates. Can you help?

We recommend trying the following:
- Carry out the puc19 transformation control; this gives you information about the performance of the cells.
- Check plates for expiration and correct media used (LB/agar).
- Confirm that the correct antibiotic and concentration was used.

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