L’ADN polymérase T7 Thermo Scientific est un ADN polymérase dépendant du modèle et qui catalyse la synthèse de l’ADN dans la direction 5’→3’. Il s’agit d’une ADN polymérase très processive, qui permet la synthèse continue de longs segments d’ADN. L’enzyme comporte également une activité exonucléase 3’→5’élevée envers l’ADN simple et double brin.
Points clés
• Forte activité exonucléase 3’→5’, environ 1 000 fois supérieure au fragment de Klenow
• Active dans les tampons d’enzymes de restriction
Applications
• Purification de l’ADN circulaire fermé de façon covalente par élimination de l’ADN génomique résiduel
• Réactions d’extension d’amorces (voirRéférence 1)
• Marquage d’extrémité d’ADN 3’ (voirRéférence 1)
• Extensions de brin dans la mutagénèse dirigée
• Remplissage de transfert d’ADN en saillie 5’
• Synthèse du second brin de l’ADNc
• Détection in situ de la fragmentation de l’ADN associée à l’apoptose
Remarque
Les dosages à 37°C ne nécessitent que de courtes périodes d’incubation .
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.