L’ADN polymérase Thermo Scientific Taq est un ADN polymérase hautement thermostable issu de la bactérie thermophile Thermus aquaticus. L’enzyme qui catalyse la synthèse 5’→3’ de l’ADN, est dépourvue d’activité exonucléase (corrective) 3’→5’ détectable et possède une activité exonucléase 5’→3’ faible. De plus, l’ADN polymérase Taq comporte une activité désoxynucléotidyl transférase, qui aboutit fréquemment à l’ajout d’adénines supplémentaires à l’extrémité 3’ des produits de PCR. L’ADN polymérase Taq recombinant convient parfaitement à la PCR standard de gabarits 5 kb ou inférieurs.

Points clés

• Thermotastable : une demi-vie est supérieure à 40 minutes à 95°C
• Génère des produits de PCR avec des extrémités saillantes 3’-dA
• Fourni avec deux tampons : tampon Taq 10X avec KCI et tampon Taq 10X avec (NH₄)₂SO₄. Ce dernier permet une PCR à une large plage de concentrations en magnésium et diminue l’amorçage non spécifique
• Incorpore des nucléotides modifiés (par ex., nucléotides marqués à la biotine, à la digoxigénine, par fluorescence)

Applications

• Amplification par PCR de routine des fragments d’ADN jusqu’à 5 kb
• PCR à haut rendement
• Marquage de l’ADN

Remarque

• Le taux d’erreur de l’ADN polymérase Taq dans la PCR est de 2,2 x 10^-5 erreurs par nt par cycle. En conséquence, la précision de la PCR est de 4,5 x 10⁴. La précision est l’inverse du taux d’erreur. Elle indique un nombre moyen de nucléotides corrects incorporés avant la survenue d’une erreur.
• Le tampon Taq 10X sans détergent est recommandé pour les expériences microarray.