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Transcriptase inverse Maxima H Minus (200 U/μl)
Thermo Scientific™

Transcriptase inverse Maxima H Minus (200 U/μl)

La transcriptase inverse (RT) Thermo Scientific Maxima H Minus a été développée par évolution in vitro de la RT M-MuLV.Afficher plus
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RéférenceQuantité
EP07534 x 10 000 unités
EP07512 000 unités
EP075210 000 unités
Référence EP0753
Prix (EUR)
714,65
Online Exclusive
872,00
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Quantité:
4 x 10 000 unités
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
714,65
Online Exclusive
872,00
Économisez 157,35 (18%)
Each
La transcriptase inverse (RT) Thermo Scientific Maxima H Minus a été développée par évolution in vitro de la RT M-MuLV. L’enzyme possède une activité de polymérase dépendante de l’ARN et dépendante de l’ADN mais ne présente aucune activité de RNase H en raison d’une mutation du domaine de RNase H de la RT M-MuLV. Cette enzyme issue du génie génétique offre une thermostabilité et une robustesse considérablement améliorées, une processivité 50X supérieure ainsi qu’un taux de synthèse accru par rapport au type de RT M-MuLV primitive.

La suppression de l’activité de RNase H permet à l’enzyme de produire de très longs transcrits d’ARN jusqu’à 20 kb. En raison de sa thermostabilité élevée, l’enzyme conserve son activité pendant toute la réaction de transcription inverse et génère des rendements élevés d’ADNc. La température de la réaction peut être augmentée jusqu’à 65°C pour une transcription efficace des régions d’ARN présentant un degré élevé de structure secondaire ou pour améliorer la spécificité à l’aide d’amorces spécifiques de certains gènes. La processivité extrêmement élevée de l’enzyme Maxima H Minus augmente la résistance aux inhibiteurs de réaction courants, tels que la guanidine, le formamide et l’éthanol.

Points clés

• Thermostable : 90 % d’activité après incubation à 50°C pendant 60 minutes dans un mélange de réactions.
• Active jusqu’à 65°C
• Hauts rendements d’ADNc de pleine longueur jusqu’à 20 kb
• Haute sensibilité : synthèse d’ADNc reproductible à partir d’une large gamme de quantités d’ARN total de départ (1 pg à 5 µg)
• Efficace : synthèse d’ADNc conplète en 15 à 30 minutes
• Une résistance aux inhibiteurs de réaction courants accrue
• Incorpore des nucléotides modifiés

Applications

• Synthèse d’ADNc premier brin pour la RT-PCR et la RT-PCR en temps réel.
• Transcription inverse à des températures élevées pour réduire les effets de la structure secondaire.
• Synthèse de l’ADNc pour le clonage et l’expression
• Génération de sondes d’ADNc marquées pour microarrays
• Analyse de l’ARN par extension d’amorce.

Remarque
• Également disponible : : Kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
Type de produit finalADNc premier brin
FormatTube
Température de réaction optimale50°C à 55°C
Quantité4 x 10 000 unités
Format de réactionComposants séparés
Type de réactifTranscription inverse
Transcriptase inverseMaxima H Minus
Activité de la ribonucléase HRéduction
Conditions d’expéditionNeige carbonique
Taille (produit final)Jusqu’à 20 kb
Matériau de départARN
TechniqueTranscription inverse
Concentration200 U / μl
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réaction15 à 30 min
Unit SizeEach
Contenu et stockage

• Transcriptase inverse H Minus Maxima, 4 x 10 000 unités (200 U/μl)
• Tampon RT 5X

Conserver à –20°C.

Foire aux questions (FAQ)

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H-minus RT or Maxima H-minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H-minus RTs for template-independent addition of C nucleotides.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H-minus RT, Maxima RT, and Maxima H-minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases possess intrinsic TdT activity although at varying degrees depending upon the reaction conditions. For addition of template-independent C nucleotides (as for SMART and RACE experiments), this specific TdT activity can be induced by Mn2+. We would recommend Maxima H- or RevertAid H- minus RTs for this purpose.

Is it preferable to use elevated temperature in the RT reaction when using Maxima reverse transcriptases?

cDNA synthesis at higher temperatures ensures successful transcription of RNA with high levels of secondary structure, reducing issues of primer access to template. Therefore, we do recommend to use RT enzymes with high thermostability, e.g. Maxima and Maxima H Minus Reverse Transcriptases, which provide higher yields of full-length cDNA, better sensitivity, and successful transcription of GC-rich templates.

Is Maxima H Minus Reverse Transcriptase (200 U/µL) (Cat. No. EP0753) available without the buffer?

No, this product is always provided with the buffer. Connect with us to explore bulk and custom formats.

What steps should I take while performing first strand cDNA synthesis using low purity template (e.g., inhibitors in RNA sample)?

Trace amounts of reagents used in RNA purification protocols may remain in solution and inhibit first-strand synthesis, e.g., SDS, EDTA, guanidine salts, phosphate, pyrophosphate, polyamines, spermidine. To remove trace contaminants, we recommend re-precipitating the RNA with ethanol and washing the pellet with 75% ethanol, or re-purifying the RNA.

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