5’			G	A	G	C	T ↓	C		3’
3’			C ↑	T	C	G	A	G		5’

L’enzyme de restriction SacI Thermo Scientific reconnaît les sites GAGCT^C et sa coupe est optimale à 37°C dans son propre tampon unique. Reportez-vous à Conditions de réaction des enzymes de restriction pour voir le tableau de l’activité enzymatique, les conditions de digestion double et l’inactivation thermique de cette enzyme et d’autres enzymes de restriction. Remarque : Également disponible en tant qu’enzyme FastDigest pour une digestion rapide de l’ADN. Isoschizomères : Eco53kI, EcoICRI, Psp124BI, SstI.

Les endonucléases de restriction classique Thermo Scientific sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour assurer une performance constante, les tampons de réaction enzymatique de restriction Thermo Scientific contiennent du BSA prémélangé, ce qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

Caractéristiques

• Qualité supérieure —contrôle de la qualité strict et procédé de fabrication de pointe
• Système à cinq tampons pratique à code couleur
• Comprend un tampon Tango universel pour les digestions doubles
• BSA prémélangé dans les tampons de réaction
• Sélection étendue des spécificités des endonucléases de restriction

Applications

• Clonage moléculaire
• Cartographie des sites de restriction
• Génotypage
• Transfert Southern
• Polymorphisme de longueur des fragments de restriction (RFLP)
• SNP

Remarque : SacI est sensible à la méthylation des cytosines dans la séquence GAGmCTC mais pas dans GAGCTmC et insensible à la méthylation de l’adénine dans la séquence GmAGCTC. AluI méthyltransférase (AGmCT) peut être utilisé pour bloquer SacI. Les plasmides superenroulés peuvent nécessiter jusqu’à 5 fois plus de SacI pour une digestion complète que l’ADN linéaire. SacI est inhibée par les anticoagulants cliniques courants que l’on rencontre dans certaines préparations de sang périphérique anticoagulé et moelle osseuse. Les concentrations d’EDTA et d’ACD (acide citrique-citrate de sodium-dextrose) dans la préparation d’échantillons standard provoquent l’inhibition de SacI. Une concentration d’héparine 3 fois supérieure à la normale est nécessaire pour inhiber SacI. (J. E. Coad et al., Inhibition of restriction endonucleases by common clinical anticoagulants. Anal. Biochem. 205, 368-369, 1992). Pour la sensibilité à la méthylation, se référer aux caractéristiques du produit.