Phusion Blood Direct PCR Master Mix
Phusion Blood Direct PCR Master Mix
Thermo Scientific™

Phusion Blood Direct PCR Master Mix

Le Master Mix Thermo Scientific Phusion Blood Direct PCR est conçu pour l’amplification de l’ADN à partir de sang total.Afficher plus
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Le Master Mix Thermo Scientific Phusion Blood Direct PCR est conçu pour l’amplification de l’ADN à partir de sang total. Avec ce kit, plus besoin de procéder à une étape de purification d’ADN distincte avant la PCR. L’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité modifiée résiste aux principaux inhibiteurs de PCR présents dans le sang et conserve son activité à des concentrations sanguines allant jusqu’à 40 % dans la réaction PCR.

Cette ADN polymérase à activité corrective précise fait du mélange Phusion Blood Direct PCR Master Mix un choix idéal, même pour les applications exigeantes, telles que le clonage. Le mélange Phusion Blood Direct PCR Master Mix permet également d’analyser des échantillons sanguins avec différents conservateurs (par exemple, héparine, EDTA, citrate), différentes conditions de conservation et diverses espèces.

Points clés

• PCR directe : l’échantillon est ajouté directement à la réaction PCR, ce qui permet d’éviter les étapes longues et coûteuses de purification de l’ADN
• Protocole de dilution et de conservation disponible : permet de réaliser des dizaines de réactions PCR à partir d’un petit échantillon et de procéder à de nouveaux tests
• ADN polymérase Phusion spécialement conçue : temps de protocole PCR extrêmement courts
• Format Master Mix avec colorant de chargement de gel pré-mélangé : minimise la possibilité de contamination croisée, réduit la manipulation des échantillons et permet le chargement direct sur gel

Applications

• Génotypage
• Détection des transgènes
• Analyse d’inactivation
• Séquençage

La température d’hybridation optimale pour les ADN polymérases Phusion peut différer significativement de celle des polymérases à base de Taq.

Pour des résultats optimaux, commencez par calculer avec précision votre Tm avec notre calculatrice Tm.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
Hot StartFonctionnalité Hot-Start (démarrage à chaud) intégrée
Comprend l’étiquette ou le colorantOui
Nbre de réactions100 réactions
En surplombArrondi
PolyméraseADN polymérase Phusion Blood II
Type de produitMaster Mix de PCR directe
Quantité100 réactions de 20 μl
Format de réactionSuperMix ou Master Mix
Type d’échantillonSang
Conditions d’expéditionWet or Dry Ice
Matériau de départADN
Concentration2X
À utiliser avec (application)Genotyping
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Méthode PCRPCR directe
Vitesse de réactionRapide
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• 2X Phusion Blood Direct PCR Master Mix, 1 mL
• Universal Control Primer Mix, 40 μL
• 50 mM EDTA, 0.5 mL
• 50 mM DMSO, 0.5 mL
• 50 mM MgCl2, 1.5 mL
• Nuclease-free water, 1.25 mL
• O'GeneRuler Express DNA Ladder, 50 μg (sufficient for 100 applications)

Store at -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

What is your recommendation to take a sample from plant or animal tissue for Direct PCR?

In order to obtain best results from Direct PCR, it is important to use a very small amount of starting materials. The recommended size is 0.3-0.5 mm in diameter. We recommend using Tissue Puncher 0.3 mm (Cat. No. F-200S), which is a convenient tool for sampling and is suitable for both plant and animal tissues.

Why are Control primers provided in the Direct PCR Kits?

It is very important to include a control reaction in the Direct PCR to ensure that the PCR conditions are optimal for the specific tissue or plant material used. Control primers are universal primers that amplify a small fragment from a conserved genome region. If the reaction with control primers fails, the sample material may not be suitable for Direct PCR, or PCR conditions need optimization.

Can I use plant or tissue sample which is not on the list of the Direct PCR Master Mix and Kit tested samples?

You can test any plant or tissue sample. However, it is recommended to first optimize the reaction. When working with new sample materials, start with the Dilution & Storage protocol as it allows several PCR reactions to be performed from the same sample during optimization. It is recommended to perform a positive control with purified sample DNA to ensure that the PCR conditions are working. If the positive control with purified DNA fails, the PCR conditions should be optimized before continuing further.

Can you amplify the same sample materials with the Direct PCR Master Mixes as with Direct PCR Kits?

Yes, the Direct PCR Master Mixes are upgrades of the Direct PCR kits and thus are suitable for the same sample materials.

What is the highest blood concentration possible in the reaction when using Phusion Blood Direct PCR Master Mix and Kit?

We recommend using blood concentration up to 20%; however, we had successful amplifications with up to 40% of blood in the reaction mix. In some cases optimization may be required to achieve this.