Phusion™ High-Fidelity DNA Polymerase & dNTP Mix (10 mM each)
Thermo Scientific™

Phusion™ High-Fidelity DNA Polymerase & dNTP Mix (10 mM each)

Cet emballage comprend l’ADN polymérase haute fidélité Phusion (4 x 500 U) et un mélange de dNTP haute qualité (10Afficher plus
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RéférenceQuantité
F530N2000 reactions
Référence F530N
Prix (EUR)
2 220,00
Each
Quantité:
2000 reactions
Prix (EUR)
2 220,00
Each
Cet emballage comprend l’ADN polymérase haute fidélité Phusion (4 x 500 U) et un mélange de dNTP haute qualité (10 mM chacun, 2 x 1 ml).

ADN polymérase haute fidélité Phusion
Les ADN polymérases Thermo Scientific Phusion haute fidélité établissent un étalon élevé pour la PCR haute performance. Grâce à un taux d’erreur 52 fois inférieur à celui de Taq et 6 fois inférieur à celui de Pfu, l’ADN polymérase Phusion haute fidélité est excellente pour le clonage et d’autres applications exigeant une haute fidélité. Les ADN polymérases Phusion offrent une performance fiable avec des délais courts de protocoles, même avec des inhibiteurs PCR. Elles produisent de meilleurs rendements avec des quantités réduites d’enzymes que les autres ADN polymérases.

• Haute fidélité (52X Taq)
• PCR rapide en raison de temps d’extension courts (15 à 30 s / kb)
• Performance robuste, optimisation minimale nécessaire
• Des rendements élevés de produits de PCR avec des quantités d’enzymes minimales

Utilisation d’ADN polymérases Phusion
Les règles d’hybridation des ADN polymérases Phusion sont différentes de nombreuses ADN polymérases courantes (telles que les ADN polymérases Taq). Pour des résultats optimaux, utilisez notre calculatrice Tm à l’adresse www.thermofisher.com/tmcalculator.

Plus d’informations sur toutes les ADN polymérases Phusion ›

Mélange de dNTP
Le mélange de dNTP Thermo Scientific contient des solutions aqueuses pré-mélangées de dATP, dCTP, dGTP et dTTP, chacune à une concentration finale de 10 mM. Les nucléotides affichent une pureté supérieure à 99 % et sont exempts d’activités de nucléases, ainsi que d’ADN humain et d’ADN d’E. coli. Les mélanges permettent de réduire le nombre d’étapes de pipetage et le risque d’erreurs de configuration des réactions.

• Pureté supérieure à 99 % confirmée par HPLC
• Sans ADN humain et d’E. coli
• Stable après plusieurs cycles de congélation-décongélation
• Jusqu’à 95 % des dNTP restent sous forme de triphosphate après 7 semaines à température ambiante
• Jusqu’à 90 % des dNTP restent sous forme de triphosphate après 30 cycles de PCR (1 minute à 94°C ; 3 minutes à 72°C)

À utiliser dans toutes les applications de biologie moléculaire, y compris PCR, PCR en temps réel, PCR haute fidélité et longue, LAMP-PCR, synthèse d’ADNc, RT-PCR, RDA, MDA, marquage de l’ADN et séquençage de l’ADN.

Plus d’informations sur tous les formats de dNTP ›
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Fidélité (par rapport à Taq)52 X
Hot StartNon
Nbre de réactions2000 réactions
En surplombArrondi
PolyméraseADN polymérase Phusion haute fidélité
Type de produitADN polymérase haute fidélité
Quantité2000 reactions
Format de réactionComposants séparés
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Taille (produit final)20 kb ou moins
Concentration10 mM de chaque
Méthode de détectionAmorce-sonde
À utiliser avec (application)PCR standard, Clonage
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Méthode PCRRT-qPCR en 1 étapes
Vitesse de réactionRapide
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• Polymérase d’ADN (2 U/µl)
• Tampon HF 5X Phusion
• Tampon GC 5X Phusion
• Solution DMSO
• 50 mM MgCl2
• Mélange dNTP 10 mM

Conserver entre -5 et -30°C.

Foire aux questions (FAQ)

What is enzyme concentration in Phusion Hot Start II High-Fidelity PCR Master Mix?

Phusion Hot Start II DNA polymerase concentration is optimized to give good results in most reactions. When the PCR reaction is set up according to the instructions, the final concentration of Phusion enzyme is 1 U in 50 µL reaction (0.4 U in 20 µL reaction).

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.

Can protocols optimized for Phusion DNA Polymerase be directly applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase?

Yes, protocols optimized for Phusion DNA Polymerase can be applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase reactions.

Do Phire and Phusion Hot Start II DNA Polymerases need a separate activation step in the PCR protocol?

No separate activation step is required since Phire and Phusion Hot Start II DNA Polymerases are inactivated by a reversibly bound, specific Affibody ligand that dissociates during initial denaturation.