Master Mix PCR haute fidélité Phusion avec tampon GC
Thermo Scientific™

Master Mix PCR haute fidélité Phusion avec tampon GC

L’ADN polymérase Thermo Scientific Phusion haute fidélité représente une méthode de référence pour la PCR haute performance. Grâce à unAfficher plus
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RéférenceComprendNbre de réactions
F532SGC Buffer100 réactions
F532LGC Buffer500 réactions
F531LHF Buffer500 réactions
F531SHF Buffer100 réactions
Référence F532S
Prix (EUR)
231,00
Each
Comprend:
GC Buffer
Nbre de réactions:
100 réactions
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
231,00
Each
L’ADN polymérase Thermo Scientific Phusion haute fidélité représente une méthode de référence pour la PCR haute performance. Grâce à un taux d’erreur 50 fois inférieur à celui de Taq et 6 fois inférieur à celui de Pfu, l’ADN polymérase Phusion haute fidélité est excellente pour le clonage et d’autres applications exigeant une haute fidélité. Les ADN polymérases Phusion offrent une performance fiable avec des délais courts de protocoles, même avec des inhibiteurs PCR. Elles produisent de meilleurs rendements avec des quantités réduites d’enzymes que les autres ADN polymérases.

Le mélange maître Phusion High-Fidelity PCR Master Mix, concentré 2X, pratique, contient de l’ADN polymérase Phusion, des nucléotides et un tampon de réaction optimisé avec MgCl2. Deux formulations du mélange maître sont disponibles : avec tampon HF (F-531S et F-531L) et avec tampon GC (F-532S et F-532L). Le taux d’erreur de l’ADN polymérase Phusion dans le tampon HF (4,4 × 10-7) est inférieur à celui du tampon GC (9,5 × 10-7). Le mélange maitre avec tampon HF doit donc être utilisé par défaut pour une amplification haute fidélité. Cependant, le tampon GC peut améliorer la performance de l’ADN polymérase Phusion avec certains modèles difficiles ou longs, comme les modèles riches en GC ou possédant des structures secondaires complexes.

Points forts

• Haute fidélité (25X Taq)
• PCR rapide en raison de temps d’extension courts (15 à 30 s/kb)
• Performances robustes, optimisation minimale requise

Applications

• Amplification de modèles difficiles (riches en GC)
• PCR haute fidélité
• Clonage
• Génération de modèles pour le séquençage
• PCR longue portée (jusqu’à 20 kb)
• Mutagenèse
• PCR à haut débit

Utilisation des ADN polymérases Phusion
Les règles d’hybridation des ADN polymérases Phusion sont différentes de celles de nombreuses ADN polymérases courantes (telles que les ADN polymérases Taq). Pour des résultats optimaux, utilisez notre calculatrice de Tm à l’adresse www.thermofisher.com/tmcalculator.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Fidélité (par rapport à Taq)25 X
Hot StartNon
ComprendGC Buffer
Nbre de réactions100 réactions
En surplombArrondi
PolyméraseADN polymérase Phusion haute fidélité
Type de produitMaster Mix de PCR haute fidélité
Quantité100 reactions
Format de réactionSuperMix ou Master Mix
Conditions d’expéditionDry Ice
Taille (produit final)20 kb ou moins
Concentration2X
À utiliser avec (application)Clonage, High-fidelity PCR
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réactionRapide
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• 2 x 1,25 ml de Master Mix Phusion avec tampon GC (2X) (fournit 1,5 mM de MgCl2 dans la réaction finale)
• 1 x 500 μl de DMSO à 100 %

Conserver à -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.