L’ADN polymérase Thermo Scientific Phusion haute fidélité représente une méthode de référence pour la PCR haute performance. Grâce à un taux d’erreur 50 fois inférieur à celui de
Taq et 6 fois inférieur à celui de
Pfu, l’ADN polymérase Phusion haute fidélité est excellente pour le clonage et d’autres applications exigeant une haute fidélité. Les ADN polymérases Phusion offrent une performance fiable avec des délais courts de protocoles, même avec des inhibiteurs PCR. Elles produisent de meilleurs rendements avec des quantités réduites d’enzymes que les autres ADN polymérases.
Le mélange maître Phusion High-Fidelity PCR Master Mix, concentré 2X, pratique, contient de l’ADN polymérase Phusion, des nucléotides et un tampon de réaction optimisé avec MgCl
2. Deux formulations du mélange maître sont disponibles : avec tampon HF (F-531S et F-531L) et avec tampon GC (F-532S et F-532L). Le taux d’erreur de l’ADN polymérase Phusion dans le tampon HF (4,4 × 10
-7) est inférieur à celui du tampon GC (9,5 × 10
-7). Le mélange maitre avec tampon HF doit donc être utilisé par défaut pour une amplification haute fidélité. Cependant, le tampon GC peut améliorer la performance de l’ADN polymérase Phusion avec certains modèles difficiles ou longs, comme les modèles riches en GC ou possédant des structures secondaires complexes.
Points forts • Haute fidélité (25X
Taq)
• PCR rapide en raison de temps d’extension courts (15 à 30 s/kb)
• Performances robustes, optimisation minimale requise
Applications • Amplification de modèles difficiles (riches en GC)
• PCR haute fidélité
• Clonage
• Génération de modèles pour le séquençage
• PCR longue portée (jusqu’à 20 kb)
• Mutagenèse
• PCR à haut débit
Utilisation des ADN polymérases Phusion Les règles d’hybridation des ADN polymérases Phusion sont différentes de celles de nombreuses ADN polymérases courantes (telles que les ADN polymérases Taq). Pour des résultats optimaux, utilisez notre calculatrice de Tm à l’adresse
www.thermofisher.com/tmcalculator.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.