Phusion™ Hot Start II DNA Polymerases (2 U/μL)

L’ADN polymérase Thermo Scientific Phusion haute fidélité représente une méthode de référence pour la PCR haute performance. Grâce à un taux d’erreur 50 fois inférieur à celui de Taq et 6 fois inférieur à celui de Pfu, l’ADN polymérase Phusion haute fidélité est excellente pour le clonage et d’autres applications exigeant une haute fidélité. Les ADN polymérases Phusion offrent une performance fiable avec des délais de protocoles courts, même avec des inhibiteurs PCR. Ils produisent de meilleurs rendements avec des quantités réduites d’enzymes que les autres ADN polymérases.

Avec l’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute-fidélité, l’amplification se fait sans formation de produits non spécifiques grâce à la combinaison de l’ADN polymérase Phusion et d’un ligand Affibody spécifique, se liant de manière réversible, qui inhibe l’activité de l’ADN polymérase à température ambiante. Le ligand Affibody inhibe également l’activité exonucléase 3´ → 5´ de la polymérase, empêchant ainsi la dégradation des amorces et du modèle d’ADN durant l’installation de la réaction. Le ligand est libéré à des températures qui stimulent l’activité de la polymérase, cette dernière devenant pleinement active. L’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud est immédiatement réactivée à hautes températures, elle ne requiert donc aucune étape d’activation séparée dans les protocoles de PCR.
L’ADN polymérase Phusion Green Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité est une combinaison de l’ADN polymérase Phusion Hot Start II et des tampons Phusion Green 5X. Les tampons comprennent un réactif de densité et deux colorants de suivi qui n’interfèrent pas avec les performances robustes de l’ADN polymérase Phusion Hot Start II. Les chercheurs peuvent charger directement des produits PCR sur un gel, ce qui en fait une option polyvalente pour une utilisation dans des applications en aval telles que le séquençage de l’ADN, la ligature et la digestion par restriction.

Points clés

• Préparation de la réaction à température ambiante
• Aucune amplification non spécifique et dégradation de l’amorce pendant la configuration de la réaction
• Aucune réactivation nécessaire grâce à la technologie Hot Start (démarrage à chaud)
• Haute fidélité (Taq 52X)
•PCR rapide compte tenu des délais courts d’extension (15 à 30 s / kb)
• Réactions robustes, optimisation minimale nécessaire
• Rendement accru du produit avec un volume minimum d’enzyme
• Chargement direct sur gels

Applications

• PCR haute fidélité
• Haut débit
• Amplification de modèles difficiles (riches en GC)
• Génération de modèles pour le séquençage
• PCR multiplex
• PCR longue portée
• Clonage
• Mutagénèse
• Microarray

Utilisation des ADN polymérases Phusion
Les règles de recuit pour les ADN polymérases Phusion sont différentes de nombreuses ADN polymérases courantes (telles que les ADN polymérases Taq). Pour des résultats optimaux, utilisez notre calculatrice de Tm à l’adresse www.thermofisher.com/tmcalculator.