Master Mix PCR haute fidélité Phusion Green Hot Start II

L’ADN polymérase Thermo Scientific Phusion haute fidélité représente une méthode de référence pour la PCR haute performance. Grâce à un taux d’erreur 50 fois inférieur à celui de Taq et 6 fois inférieur à celui de Pfu, l’ADN polymérase Phusion haute fidélité est excellente pour le clonage et d’autres applications exigeant une haute fidélité. Les ADN polymérases Phusion ont des performances élevées avec des délais de protocoles courts, même avec des inhibiteurs PCR. Ils offrent de meilleurs rendements avec des quantités réduites d’enzymes que les autres ADN polymérases.

Points clés

• Préparation de la réaction à température ambiante
• Aucune amplification non spécifique ni dégradation de l’amorce pendant la configuration de la réaction
• Aucune réactivation nécessaire grâce à la technologie unique de démarrage à chaud
• Haute fidélité (52X Taq)
• PCR rapide compte tenu des délais courts d’extension (15 à 30 s / kb)
• Réactions robustes, optimisation minimale nécessaire
• Rendements accrus du produit avec des volumes minimums d’enzyme
• Chargement direct sur gels

Avec les ADN polymérases Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité, l’amplification se fait sans formation de produits non spécifiques grâce à la combinaison de l’ADN polymérase Phusion et d’un ligand Affibody spécifique, se liant de manière réversible, qui inhibe l’activité de l’ADN polymérase à température ambiante. Le ligand Affibody inhibe également l’activité exonucléase 3´ → 5´ de la polymérase, empêchant ainsi la dégradation des amorces et du modèle d’ADN durant l’installation de la réaction. Le ligand est libéré à des températures qui stimulent l’activité de la polymérase, cette dernière devenant pleinement active. L’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud est immédiatement réactivée à hautes températures et ne requiert donc aucune étape d’activation distincte dans les protocoles PCR.
Les mélanges PCR Phusion Green Master Mix Hot Start II haute fidélité sont des mélanges 2X pratiques conçus pour minimiser le nombre d’étapes de pipetage. Le mélange Master Mix contient de l’ADN polymérase Phusion Hot Start II, des nucléotides et un tampon de réaction optimisé incluant du MgCl₂. Le tampon contient un réactif de densité et deux colorants de suivi qui favorisent le chargement direct des produits issus de la PCR sur un gel.

Applications

• PCR haute fidélité
• Haut débit
• Amplification de modèles difficiles (riches en GC)
• Génération de modèles pour le séquençage
• PCR multiplexe
• PCR à haut débit
• Clonage
• Mutagénèse
• Microarray

Utilisation d’ADN polymérases Phusion
Les règles d’hybridation des ADN polymérases Phusion sont différentes de celles de nombreuses ADN polymérases courantes (telles que les ADN polymérases Taq). Pour des résultats optimaux, utilisez notre calculatrice de Tm à l’adresse www.thermofisher.com/tmcalculator.