Thermo Scientific™

Kit de synthèse d’ADNc monocaténaire RevertAid

Name: Kit de synthèse d’ADNc monocaténaire RevertAid
SKU: K1622
Price: 335.65 EUR

Le kit Thermo Scientific RevertAid de synthèse d’ADNc premier brin est un système complet permettant une synthèse efficace de l’ADNcAfficher plus

Modifier l'affichage

Référence	Nbre de réactions
K1622	100 réactions
K1621	20 réactions

2 options

Référence K1622

Prix (EUR)

335,65

온라인 행사

420,00

Économisez 84,35 (20%)

Each

Nbre de réactions:

100 réactions

Grand volume ou format personnalisé

Prix (EUR)

335,65

온라인 행사

420,00

Économisez 84,35 (20%)

Each

Le kit Thermo Scientific RevertAid de synthèse d’ADNc premier brin est un système complet permettant une synthèse efficace de l’ADNc premier brin à partir de modèles d’ARN. Le kit utilise la transcriptase inverse (RT) RevertAid, une M-MuLV RT recombinante qui maintient l’activité à une température comprise entre 42 et 50°C et convient à la synthèse d’ADNc jusqu’à 13 kb. L’inhibiteur RNase RiboLock, fourni avec le kit, protège efficacement les modèles d’ARN de la dégradation.
Le kit RevertAid de synthèse d’ADNc premier brin est fourni avec l’amorce oligo(dT)₁₈ ainsi qu’avec les amorces hexamères aléatoires. L’amorce oligo(dT)₁₈ hybride de façon sélective sur la queue poly(A) de l’ARNm. Les amorces hexamères aléatoires ne nécessitent pas la présence de la queue poly(A) ; par conséquent, elles peuvent être utilisées pour la transcription de régions à extrémité de 5’ de synthèse d’ARNm ou ADNc d’espèces d’ARN privées de queue poly(A) (par exemple, les micro-ARN). Les amorces spécifiques aux gènes peuvent également être utilisées avec le kit.

Points clés

• ADNc premier brin pleine longueur jusqu’à 13 kb
• Température de réaction optimale : 42°C
• Kit complet : tous les composants pour la réaction RT sont inclus

Applications

• Synthèse d’ADNc premier brin pour RT-PCR et RT-qPCR
• Construction de bibliothèques d’ADNc pleine longueur
• Synthèse d’ARN antisens

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications

Type de produit finalADNc premier brin

FormatKit

Nbre de réactions100 réactions

Température de réaction optimale42°C

Quantité100 reactions

Format de réactionComposants séparés

Type de réactifTranscription inverse

Transcriptase inverseRevertAid

Activité de la ribonucléase HOui

Conditions d’expéditionNeige carbonique

Taille (produit final)Jusqu’à 13 kb

Matériau de départARN

TechniqueTranscription inverse

À utiliser avec (application)PCR en temps réel (qPCR)

Vitesse de réaction60 min

Unit SizeEach

Contenu et stockage

• Transcriptase inverse RevertAid
• Inhibiteur d’ARNase RiboLock
• Tampon de réaction 5X
• Mélange de dNTP
• Oligo(dT)₁₈ Amorce
• Amorce hexamère aléatoire
• ARN de GAPDH de contrôle
• Amorce de GAPDH sens (10 μM)
• Amorce de GAPDH antisens (10 μM)
• Eau exempte de nucléase

Conserver à –20°C.

Foire aux questions (FAQ)

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H-minus RT or Maxima H-minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H-minus RTs for template-independent addition of C nucleotides.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H-minus RT, Maxima RT, and Maxima H-minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases possess intrinsic TdT activity although at varying degrees depending upon the reaction conditions. For addition of template-independent C nucleotides (as for SMART and RACE experiments), this specific TdT activity can be induced by Mn2+. We would recommend Maxima H- or RevertAid H- minus RTs for this purpose.

What steps should I take while performing first strand cDNA synthesis using low purity template (e.g., inhibitors in RNA sample)?

Trace amounts of reagents used in RNA purification protocols may remain in solution and inhibit first-strand synthesis, e.g., SDS, EDTA, guanidine salts, phosphate, pyrophosphate, polyamines, spermidine. To remove trace contaminants, we recommend re-precipitating the RNA with ethanol and washing the pellet with 75% ethanol, or re-purifying the RNA.

For reverse transcription, how important is the quality of RNA template?

RNA purity and integrity are essential for synthesis and quantification of cDNA. Always assess the integrity of RNA prior to cDNA synthesis. Use freshly prepared RNA. Multiple freeze/thaw cycles of the RNA sample and synthesized cDNA is not recommended. Avoid RNase contamination and discard low quality RNA.

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H Minus RT or Maxima H Minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H Minus RTs for template-independent addition of C nucleotides. In contrast, reverse transcriptases with intrinsic RNase H activity are often favored in 1-step RT-qPCR applications.

View all Kit de synthèse d’ADNc monocaténaire RevertAid FAQs