La lignée cellulaire LanthaScreen®IkB alpha GripTite® contient une protéine de fusion composée du codage de l’ADNc pour le GFP et l’IkB (le GFP est fusionné au terminus N d’IkB alpha) sous le contrôle d’un promoteur CMV transfecté de façon stable dans les cellules GripTite®. GripTite® est une lignée cellulaire HEK293 modifiée; cette lignée cellulaire rénales humaines montre une activation inductible de la voie de signalisation NFkB par un certain nombre de ligands différents, tels que TNF et IL-1. L’activation de la voie NFkB implique l’activation d’IKK, entraînant la phosphorylation de sa protéine cible IkB alpha. Cette lignée cellulaire LanthaScreen permet donc l’analyse de l’activité IKK à l’aide de la phosphorylation GFP-IkB alpha comme lecture. La construction GFP-IkB alpha a été transfectée dans les cellules GripTite® à l’aide de Lipofectamine™2000, suivie d’une sélection avec la blasticidine. Cette lignée cellulaire est une population clonale isolée par la cytométrie en flux utilisant la fluorescence GFP comme marquage de tri. Cette lignée cellulaire est validée pour EC50 et Z’ dans des conditions optimisées en utilisant TNF comme ligand pour la phosphorylation ou l’ubiquitination GFP-IkB médiée par IKK. Cette lignée cellulaire a été dosageée pour des performances de dosage dans des conditions expérimentales variables, y compris la densité d’étalement cellulaire, le temps de stimulation, la tolérance DMSO et le temps de développement du dosage. D’autres informations utilisant d’autres stimuli sont également disponibles. Les clients universitaires et sans but lucratif sont priés de se renseigner sur les tarifs spéciaux.