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Minikit d’ADN génomique PureLink™
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Minikit d’ADN génomique PureLink™

Le mini kit d’ADN génomique PureLink™ permet l’extraction d’ADN génomique (ADNg) à haut rendement et haute pureté à partir d’uneAfficher plus
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RéférenceQuantité
K18200010 préparations
K18200150 préparations
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Référence K182000
Prix (EUR)
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Le mini kit d’ADN génomique PureLink™ permet l’extraction d’ADN génomique (ADNg) à haut rendement et haute pureté à partir d’une grande variété de types d’échantillons. Utilisez ce kit simple pour la purification d’ADN génomique (ADNg) à partir de sang, de tissus, de cellules, de bactéries, d’écouvillons et de taches de sang, dans un format familier de colonne à centrifuger à base de silice. Caractéristiques du mini kit d’ADN génomique PureLink™ :

• Flexibilité du kit : un kit fonctionne avec un large éventail de types et de tailles d’échantillons
• ADN génomique ultrapropre : contamination minimale du produit d’ADN pour une application en aval réussie Conception optimisée : conception à colonne à centrifuger et formule tampon optimisées pour un rendement et une pureté accrus

Sources d’échantillons multiples, un seul kit
Le mini kit d’ADN génomique Purelink™ peut être utilisé avec de nombreux types d’échantillons différents, chacun avec son propre protocole optimisé décrit dans le manuel.

Composants et protocoles optimisés Le mini kit d’ADN génomique PureLink™ inclut des composants et des protocoles qui améliorent les méthodes de colonne à centrifuger simples et familières actuellement utilisées (voir figure). Les colonnes sont reconfigurées pour lier et libérer l’ADN plus efficacement (voir figure). Chaque source d’échantillon utilise une procédure de lyse spécialisée et un tampon de lyse optimisé qui sont formulés pour améliorer l’activité de la protéinase K et éliminer la contamination des protéines. Un tampon de sel chaotropique favorise une liaison stable de l’ADN à la résine de la colonne, et les tampons de nettoyage puissants éliminent toute trace de protéine et de sel. L’ADN est élué dans un tampon à faible teneur en sel afin de permettre la stabilisation du pH de l’ADN en conserver.

Rendements et pureté supérieurs
Avec les kits d’ADN génomique PureLink™, vous pouvez vous attendre à des rendements élevés en ADNg haute pureté (déterminés par les mesures A260 / A280), quel que soit le type d’échantillon, des bactéries aux tissus en passant par le sang et les cellules en culture (voir figures). Les nouveaux tampons de lyse et de nettoyage PureLink™ permettent de délivrer systématiquement des échantillons d’ADNg purifiés avec des taux de lecture d’absorbance de ∼1,9 pour les mesures A260 / A280 et A260 / A230, indiquant l’absence de contamination croisée décelable des protéines ou de la guanidine (voir figure).
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (application)Génotypage, PCR quantitative en temps réel (qPCR), transfert Southern, séquençage, PCR
Compatibilité à haut débitNon compatible avec des cadences élevées (manuel)
Échelle de préparationÉchantillons de sang de 100 µl à 1 ml (échelle moyenne)
Gamme de produitsPureLink
Type de produitMini kit d’ADN génomique
Quantité10 préparations
Type d’échantillonBactéries, Sang, Cellules, Mouchoir
BalanceMini
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
CibleADN génomique
Isolation TechnologyColonne de centrifugation de silice
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• Tampon de liaison / lyse génomique PureLink™ de 2,0 ml
• tampon de digestion génomique PureLink™ de 1,8 ml
• tampon de nettoyage génomique 1 PureLink™ de 2,0 ml
• tampon de nettoyage génomique 2 PureLink™ de 1,5 ml
• tampon d’élution génomique PureLink™ de 2,0 ml
• RNase A de 0,4 ml (20 mg / ml)
• Protéinase K de 0,2 ml (20 mg / ml)
• colonnes de centrifugation 10 PureLink™ avec tubes de prélèvement
• tubes de prélèvement 20 PureLink™ (2,0 ml)

Conserver tous les composants à température ambiante.

Foire aux questions (FAQ)

I want to isolate genomic DNA from bacteria. How do I do this?

We would recommend using our PureLink gDNA Mini Kit or our ChargeSwitch gDNA Mini Bacteria Kit (Cat. No. CS11301), which can isolate both gram-positive and gram-negative bacteria. No centrifugation or filtration steps are necessary using this simple one-tube protocol. Read more about bacterial DNA extraction here (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/dna-extraction/genomic-dna-extraction/bacteria-dna-extraction.html).

Do you offer a kit that will allow me to sequentially isolate gDNA and total RNA from my tissue sample that is not an FFPE (formalin-fixed, paraffin-embedded) sample?

We offer TRIzol reagent that will allow isolation of DNA and RNA from the same sample. Alternatively, we have the following method that has been validated by our R&D team; for sequential isolation of gDNA and total RNA from the same sample. This method involves using 2 of our kits: 1) PureLink RNA Mini Kit (Cat. No. 12183018A, 12183020, 12183025) and 2) PureLink Genomic DNA Mini Kit (Cat. No. K182002, K182000, K182001).

The protocol is detailed below:

Before starting:
- Label all spin columns and buffers from each kit with kit names to prevent confusion.
- Prepare lysis buffer and wash buffers according to the protocol from each kit.
1. Preparing lysates:
- Add 300 µL of lysis buffer (from Purelink RNA Mini Kit, beta-mercaptoethanol added) to cell or tissue sample, lyse the cells as recommended.

2. DNA isolation:
- Load all of the lysate directly onto a Purelink gDNA column (from PureLink Genomic DNA Mini Kit), save flow-through for RNA isolation.
- Centrifuge the Purelink gDNA column at 10,000 x g for 1 min.
- Wash the Purelink gDNA column with 500 µL of Wash Buffer 1 (from PureLink Genomic DNA Mini Kit, ethanol added), centrifuge at 10,000 x g for 1 min.
- Add 500 µL of Wash Buffer 2 (from PureLink Genomic DNA Mini Kit, ethanol added), centrifuge at maximum speed for 3 min to dry the membrane.
- Add 100 µL of Elution Buffer (from PureLink Genomic DNA Mini Kit), incubate at room temperature for 1 min and centrifuge at 10,000 x g for 1 min (yield can be increased if an optional second elution step is added).
- This is purified gDNA.

3. RNA isolation:
- To the above saved flow-through, add same volume of 70% ethanol, mix well and load the lysate/ethanol mix (including all precipitates) onto an RNA spin cartridge (from Purelink RNA Mini Kit).
- Centrifuge at 12,000 x g for 15 sec. Discard flow-through.
- Wash the RNA spin cartridge with 700 µL of Wash Buffer 1 (from Purelink RNA Mini Kit, ethanol added), centrifuge at 12,000 x g for 15 sec.
- Wash twice with 500 µL of Wash Buffer 2 (from Purelink RNA Mini Kit, ethanol added). After the second wash, centrifuge at 12,000 x g for 1 min to dry the membrane.
- Add 50 µL of RNase-free water onto the RNA spin cartridge, incubate at room temperature for 1 min and centrifuge at 12,000 x g for 2 min (yield can be increased if an optional second elution step is added).
- This is purified RNA.

With the Oncomine BRCA Research Assay, which method do you recommend for isolating gDNA?

We recommend the following DNA isolation kits:

- RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPE (Cat. No. AM1975)
- Ion Ampliseq Direct FFPE DNA Kit (Cat. Nos. A31133, A31136)
- MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit (Cat. No. A31881)
- PureLink Genomic DNA Mini Kit (Cat. Nos, K182000, K182001, K182002)