TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli

Le kit TA Cloning™ combiné au vecteur pCR™2.1 offre une stratégie de clonage rapide et en une seule étape, permettant d’insérer directement un produit PCR amplifié par Taq dans un vecteur plasmidique. Le kit TA Cloning™ s’appuie sur le vecteur de clonage pCR™2.1 et la ligase d’ADN ExpressLink™ T4 de façon à générer à température ambiante et en quinze minutes un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir >80 % de produits recombinants comportant des inserts.

Caractéristiques du kit TA Cloning™ avec le vecteur pCR™ 2.1 :
• Rapide et pratique—ligature à température ambiante en 15 minutes
• Efficace—sélection bleue/blanche et >80 % de clones avec insert correct
• Flexible—résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
• Sans tracas—élimination de toute modification enzymatique des produits de PCR
• Simplification—aucune amorce pour PCR contenant des sites de restriction nécessaire

Caractéristiques du vecteur pCR™ 2.1 :
• Saillies 3’-T pour la ligature directe des produits de PCR amplifiés par Taq
• Accélérateur de T7 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
• Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
• Sites d’amorce M13 directs et inversés pour le séquençage

Fonctionnement du TA Cloning™
L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique à l’extrémité 3’ des produits de PCR. Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de déoxythymidine 3’ (T) simple. Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.

Configurations du kit
Le kit TA Cloning™ est proposé dans différentes configurations : sans cellules compétentes (K2020-20 et K2020-40), avec des cellules chimiquement compétentes INVF’ E. coli One Shot™ (K2000-01 et K2000-40), avec des cellules chimiquement compétentes TOP10F’ E. coli One Shot™ (K2030-01 et K2030-40), et avec des cellules chimiquement compétentes E. coli One Shot™ TOP10 (K2040-01 et K2040-40), dans des configurations à 20 ou 40 réactions.