Le kit de purification plasmidique PureLink™ Pro Quick96 associe la chimie d’extraction avancée des plaques de silice à une conception optimisée des plaques à 96 puits pour le traitement manuel ou automatisé de l’ADN plasmidique d’E. coli en 45 minutes (tableau 1). Le kit de purification plasmidique PureLink™ Pro Quick96 vous permet de :

• Obtenir des rendements toujours élevés d’ADN plasmidique de haute pureté
• Bénéficier d’une facilité d’utilisation et de meilleures performances grâce à une amélioration du protocole et de la conception des plaques
• Augmenter la flexibilité de traitement avec les protocoles pour centrifugeuse, la rampe à vide ou les plateformes automatisées

Fonctionnement
Le kit de purification plasmidique PureLink™ Pro Quick96 utilise deux plaques à 96 puits, une plaque de filtration (joint torique transparent) et une plaque de liaison (joint torique rouge) pour purifier l’ADN plasmidique. Les cellules bactériennes sont soumises à une lyse alcaline et sont pelletisées par centrifugation. Le lysat bactérien est ensuite appliqué à la plaque de filtration Quick96 pour élimination et prélèvement dans la plaque de liaison Quick96, où l’ADN plasmidique se lie à la membrane de silice. Après les étapes de nettoyage pour élimination des contaminants, l’ADN purifié est élué et prêt à être utilisé dans les applications en aval. Cette méthode peut être entièrement réalisée en 45 minutes (figure 1).

Amélioration de la conception des plaques
Le kit de purification plasmidique PureLink™ Pro Quick96 offre des plaques à 96 puits à demi-jupe pour des performances et des résultats améliorés (figure 2). La plaque de filtration Quick96 est conçue pour une élimination rapide et efficace des lysats bactériens. La plaque de liaison Quick96 offre une capacité de liaison accrue allant jusqu’à 20 µg d’ADN plasmidique. En outre, les buses de plaque avec col annulaire empêchent la contamination croisée des échantillons et améliorent le séchage de la membrane de silice pour empêcher le transfert d’éthanol. De plus, le traitement des échantillons peut être effectué manuellement à l’aide d’un collecteur à vide de paillasse, par centrifugation ou avec une plateforme automatisée de manipulation des liquides. Les plaques à demi-jupe sont compatibles avec la plupart des rampes à vide des stations de travail robotisées.

Rendements et pureté plus élevés
Le kit de purification plasmidique PureLink™ Pro Quick96 permet une purification rapide et reproductible, jusqu’à 20 µg d’ADN plasmidique, à partir de souches d’E. coli cultivées dans un volume maximal de 5 ml de LB, 3 ml de 2xYT ou 3 ml de TB. Dans une plateforme automatisée utilisant 1,5 ml de culture d’E. coli cultivée dans un bloc de puits carrés pendant la nuit, les rendements typiques sont de 5 à 15 µg d’ADN plasmidique, avec une moyenne de 9,4 µg (figure 3). L’ADN plasmidique qui en résulte est surenroulé, sans ADN génomique ni ARN détectable (figure 4). Le kit de purification plasmidique PureLink™ Pro Quick96 offre des rendements plus élevés d’ADN plasmidique de haute qualité pour une utilisation dans les applications en aval courantes telles que le séquençage automatisé, la PCR, la digestion par des enzymes de restriction et le clonage.